經(jīng)鼻靶向中樞應(yīng)用CGRP對SAH后CVS的緩解作用及對血管新生的促進(jìn)作用.pdf

1、研究目的： 1、探討CGRP經(jīng)鼻給藥后對SAH后CVS的緩解作用。 2、探討經(jīng)鼻應(yīng)用CGRP對SAH后血管新生的影響和機制。 研究方法： 1、選用健康成年雄性Wister大鼠，采用枕大池二次注血法建立SAH模型，將動物隨機分為正常對照組、SAH組、經(jīng)鼻NS SAH組、經(jīng)鼻CGRP SAH組。用體式顯微鏡及活體循環(huán)檢測系統(tǒng)在第二次SAH72h觀察基底動脈（BA）管徑；用激光多普勒血流計在第一次SAH制作前，

2、第二次SAH鼻腔給藥后1/2h，1h，6h，12h各測量一次頂葉皮層局部腦血流量（rCBF），對大鼠局部腦血流量進(jìn)行動態(tài)觀察。 2、建立大鼠SAH模型，將動物隨機分為正常對照組、SAH組、經(jīng)鼻NS SAH組、經(jīng)鼻CGRP SAH組。于第二次SAH后72h，制備新鮮腦組織冠狀冰凍切片，用熒光免疫組化法檢測皮層和海馬CD31的表達(dá)，用圖像分析儀計數(shù)新生血管密度；用逆轉(zhuǎn)錄RT-PCR技術(shù)測定大腦皮層、海馬等部位血管內(nèi)皮生長因子（vas

3、cular endothel ial growth factor，VEGF）mRNA表達(dá)；用West blot、免疫熒光法檢測皮層和海馬VEGF的表達(dá)。 研究結(jié)果： 1、各組動物第二次SAH后72h，SAH組和NS SAH組大鼠BA明顯痙攣，管徑縮窄嚴(yán)重，與正常對照組有顯著性差異（P<0．01）； CGRP SAH組大鼠BA輕微痙攣，管徑攣縮不明顯，與SAH組和NS SAH組有顯著性差異（P<0．01）。各組大鼠BA管徑

4、分別為正常對照組的48．18%、47．69%、93．13%。第二次SAH后SAH組和NS SAH組，rCBF顯著降低，與正常對照組有顯著性差異（P<0．01）； CGRP SAH組rCBF降低的程度小，與SAH組和NS SAH組有顯著性差異（P<0．01）。各組在第二次SAH后rCBF降低，1h下降至最低值，在12 h內(nèi)無明顯恢復(fù)趨勢。 2、第二次SAH后72h，SAH組、經(jīng)鼻NS SAH組與正常對照組比較皮層和海馬CD31、V

5、EGF表達(dá)增強，有較多陽性細(xì)胞（P<0．01）；經(jīng)鼻CGRP SAH組表達(dá)最強，有大量的免疫陽性細(xì)胞分部，與SAH組和NS SAH組有顯著性差異（P<0．01）。S AH組和NS SAH組與正常對照組比較皮層和海馬VEGF mRNA、VEGF蛋白表達(dá)增加（P<0．01）；經(jīng)鼻CGRP SAH組表達(dá)最強，與SAH組和NS SAH組有顯著性差異（P<0．01）。 研究結(jié)論： 1、經(jīng)鼻給予CGRP能緩解SAH后BA血管痙攣，增