肝豆扶木湯對實(shí)驗(yàn)性Wilson病模型大鼠肝臟保護(hù)作用的研究.pdf

1、背景：Wilson病（WD）是一種常見于青少年由銅代謝障礙引起的隱性遺傳病。目前，此病為少數(shù)幾種可以治療的神經(jīng)系統(tǒng)遺傳病之一，中醫(yī)藥在WD的臨床治療中已取得令人矚目的成就，但迄今為止,無論中藥還是西藥，臨床大多以驅(qū)銅為前提進(jìn)行本病的干預(yù)治療。由于肝臟在本病發(fā)病及銅代謝中具有中心支配地位,故加強(qiáng)肝臟保護(hù)作用已日益受到重視，同時(shí)加強(qiáng)肝臟保護(hù)作用的治療也為中醫(yī)治療本病的分期、分型用藥提供依據(jù)。 目的：觀察肝豆扶木湯（GDFMT）對實(shí)驗(yàn)

2、性Wilson?。╓D）模型大鼠的肝臟保護(hù)作用，用以指導(dǎo)臨床WD的分型、分期用藥。 方法: 64只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、青霉胺組、護(hù)肝片組、GDFMT高劑量組、GDFMT中劑量組、GDFMT低劑量組和GDFMT+青霉胺組。除正常組外，其余7組大鼠予以硫酸銅灌胃和飲含硫酸銅的蒸餾水4周復(fù)制成實(shí)驗(yàn)性WD大鼠模型。造模成功后各組進(jìn)行給藥4周，期間，除正常組外，其余各組均繼續(xù)以硫酸銅灌胃和飲用含銅水。第8周，各組大

3、鼠處死后，進(jìn)行肝功能生化（指標(biāo)為ALT，AST，TP，ALB）、血清銅檢查，觀察肝功能、血清銅含量變化，取部分肝組織勻漿后檢測SOD活性、MDA含量及其肝銅含量，同時(shí)另取部分肝組織光鏡下進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察。 結(jié)果: 與空白組比較，模型組大鼠體重增長速度明顯降低，皮毛欠光澤量明顯減少，容易激惹，部分大鼠出現(xiàn)肢體強(qiáng)直、扭轉(zhuǎn)，觀察舌質(zhì)可見舌質(zhì)紫暗，有明顯的瘀斑、瘀點(diǎn)；模型組大鼠血清中ALT、AST明顯升高（P＜0.01），TP、ALB明顯

4、降低（P＜0.01）；肝組織SOD活性明顯降低（P＜0.01），MDA含量明顯升高（P＜0.01）；肝銅和血清銅含量明顯增高（P＜0.01）；病理可見肝細(xì)胞大量壞死、變性和纖維組織增生。與模型組比較，GDFMT高、中、低劑量組和GDFMT+青霉胺組大鼠血清中ALT、AST值均降低（P＜0.05或P＜0.01），TP、ALB的值增高（P＜0.05或P＜0.01）；肝組織SOD活性增高（P＜0.05或P＜0.01），MDA含量降低（P＜0.

5、05或P＜0.01）；GDFMT高、中劑量組和GDFMT+青霉胺組大鼠肝銅、血清銅含量降低（P＜0.05）；病理形態(tài)學(xué)可見GDFMT各用藥組和GDFMT+青霉胺組有明顯好轉(zhuǎn)，表現(xiàn)為肝細(xì)胞壞死、變性及纖維增生減少。與青霉胺組比較，GDFMT高、中、低劑量組和GDFMT+青霉胺組大鼠血清中ALT、AST值顯著降低（P＜0.05或P＜0.01），TP、ALB值顯著升高（P＜0.05或P＜0.01）； GDFMT高劑量組和 GDFMT+青霉胺組

6、大鼠肝組織中SOD活性增高（P＜0.05），MDA含量降低（P＜0.05）。與護(hù)肝片組比較，GDFMT高、中劑量組和GDFMT+青霉胺組大鼠肝銅和血清銅含量顯著降低（P＜0.05或P＜0.01）；肝組織中SOD活性增高（P＜0.05或P＜0.01），MDA含量降低（P＜0.05或P＜0.01）。與GDFMT高、低劑量組比較，GDFMT+青霉胺組大鼠各項(xiàng)指標(biāo)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。 結(jié)論: 1. 由慢性銅中毒

7、所致的實(shí)驗(yàn)性WD模型大鼠存在嚴(yán)重肝臟損害，表現(xiàn)為血清ALT、AST明顯升高，TP、ALB顯著下降，同時(shí)肝銅含量也明顯增高，病理可見肝細(xì)胞的灶性壞死、脂肪變性和纖維組織增生等，同時(shí)模型大鼠還表現(xiàn)出體重降低、易激惹、肢體扭轉(zhuǎn)強(qiáng)直、舌質(zhì)紫暗有瘀斑點(diǎn)等，這些改變基本符合WD的臨床表現(xiàn)，表明此模型可較好的模擬WD的臨床特征，可以用作WD的實(shí)驗(yàn)研究。 2. GDFMT可降低實(shí)驗(yàn)性WD模型大鼠血清ALT、AST值，升高TP、ALB值，表明該藥

8、具有肝臟保護(hù)作用。同時(shí)，GDFMT+青霉胺聯(lián)合治療可以同時(shí)發(fā)揮GDFMT的保肝作用和青霉胺的排銅作用，在治療WD方面具有一定優(yōu)勢。 3. 本課題研究表明GDFMT其保肝作用可能通過以下兩個途徑實(shí)現(xiàn)：一是該藥能能增加實(shí)驗(yàn)性WD模型大鼠肝臟中SOD活性，降低MDA含量，調(diào)節(jié)氧化/抗氧化失衡，防治脂質(zhì)過氧化，從而針對銅造成肝細(xì)胞損害的關(guān)鍵機(jī)制起作用；二是 GDFMT具有一定的排銅功效，能減少肝臟中銅的沉積，減輕銅對肝臟的毒性，進(jìn)而發(fā)揮