ATF3和SRD5A2與單純性尿道下裂的關系.pdf

1、尿道下裂主要表現(xiàn)為異位的尿道外口，在男性新生兒中其發(fā)病率約為1／250～300，它是男性泌尿生殖系統(tǒng)最常見先天性畸形之一。近30年來尿道下裂的發(fā)病率呈逐年升高趨勢，大部分是散發(fā)的、無遺傳和家族史。既往研究顯示尿道下裂存在家族性單基因遺傳現(xiàn)象，或伴發(fā)于其它的遺傳疾病綜合癥，同時也有研究發(fā)現(xiàn)環(huán)境因素與尿道下裂有關，目前認為尿道下裂是遺傳和環(huán)境因素綜合作用的結(jié)果。 胎兒尿道發(fā)育有賴于足量的雄性激素，它包括睪酮和雙氫睪酮，睪酮在由SR

2、D5A2基因編碼的Ⅱ型5α-還原酶的作用下轉(zhuǎn)化成活性更高的雙氫睪酮。研究證明Ⅱ型5α-還原酶的功能異常、SRD5A2基因突變和尿道下裂的發(fā)生有密切關系，至今已發(fā)現(xiàn)約40種突變類型，大部分表現(xiàn)為誤義突變和無義突變。以往對該基因的研究主要集中在家族性和伴發(fā)于其它遺傳疾病綜合癥的尿道下裂，對散發(fā)的單純性尿道下裂研究較少。 ATF3是堿性亮氨酸拉鏈區(qū)(bZIP)家族中ATF／CREB轉(zhuǎn)錄因子亞家族的成員之一。研究發(fā)現(xiàn)ATF3通過復雜的機

3、制調(diào)節(jié)其靶基因的表達，它與內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定、傷口愈合、細胞粘附、腫瘤細胞浸潤和信號轉(zhuǎn)導通路有關。2003年，wang等采用微陣列技術(shù)發(fā)現(xiàn)ATF3是尿道下裂相關基因之一，提示ATF3基因除了對應激產(chǎn)生保護性反應外，可能與尿道下裂發(fā)生過程中的應激應答有關。進一步研究ATF3和散發(fā)的單純性尿道下裂的關系，有可能揭示ATF3在其發(fā)病中的作用機制。 家族性尿道下裂約占7％，其余的大部分為散發(fā)的單純性尿道下裂。目前還沒有證實單純性尿道下裂的共同致

4、病基因，但公認為該疾病的發(fā)生受到雄激素影響，具有復雜的遺傳背景，是遺傳和環(huán)境相互作用改變了基因的表達。通過研究ATF3和SRD5A2在單純性尿道下裂中的表達，以及篩查ATF3基因和SRD5A2基因的突變，進一步明確它們和散發(fā)的單純性尿道下裂的關系，為以后研究尿道下裂的病因做好準備。 第一章 ATF3和SRD5A2在單純性尿道下裂中的表達及意義 目的：研究ATF3、SRD5A2在尿道下裂包皮組織中的表達情況，探索ATF3、

5、SRD5A2和散發(fā)的單純性尿道下裂之間的關系。 方法：采用免疫組織化學的方法，在蛋白質(zhì)水平檢測ATF3蛋白在散發(fā)的單純性尿道下裂患者和對照組人群之間的表達情況。采用RT-PCR的方法，在RNA水平檢測ATF3mRNA和SRD5A2mRNA在上述兩組人群之間的表達差異。 結(jié)論：SRD5A2 mRNA在尿道下裂組和對照組中的表達沒有差別。對照組人群包皮組織中ATF3沒有表達或者其表達量很少，散發(fā)的單純性尿道下裂患者包皮組織中

6、ATF3的表達明顯增多，提示ATF3和散發(fā)的單純性尿道下裂關系密切。進一步研究尿道下裂中ATF3產(chǎn)生的分子基礎和ATF3相關的信號轉(zhuǎn)導通路，有可能揭示散發(fā)的單純性尿道下裂的病因。 第二章ATF3和SRD5A2基因突變與單純性尿道下裂的關系 目的：檢測散發(fā)的單純性尿道下裂患者ATF3基因和SRD5A2基因的突變情況，初步探索單純性尿道下裂和基因突變的關系。 方法：從外周血提取DNA，采用PCR方法分別擴增ATF3基