色譜-質(zhì)譜聯(lián)用篩選苔蘚植物中化學(xué)成分及片葉苔素D藥代動(dòng)力學(xué)分析.pdf

1、苔蘚是植物界中一個(gè)重要的門(mén)類(lèi)，從該類(lèi)植物中已分離得到了大量的萜類(lèi)及芳香族類(lèi)化合物，結(jié)構(gòu)新穎，其中一些化合物表現(xiàn)出良好的生物活性。隨著分析手段的進(jìn)步和組織培養(yǎng)的成功，對(duì)苔類(lèi)植物中活性成分的研究越來(lái)越多，現(xiàn)已證明苔蘚植物是具有生物活性天然產(chǎn)物的重要寶庫(kù)。 近年來(lái)隨著腫瘤及HIV感染者的增加，器官移植、導(dǎo)管插管和內(nèi)窺鏡技術(shù)的普遍開(kāi)展，廣譜抗生素、免疫抑制劑及類(lèi)固醇激素的應(yīng)用，真菌感染特別是深部真菌感染的發(fā)病率大大增加。目前臨床使用的抗

2、真菌藥物由于耐藥性及毒副作用等局限，已不能滿足需要。因此仍需努力尋找高效低毒的抗真菌藥物。 本論文分別采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（LC-MS/MS）以及氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）建立了快速篩選苔蘚植物中雙聯(lián)芐化合物和對(duì)映-貝殼杉烷型二萜化合物的方法。并對(duì)其中具有較好抗真菌活性的雙聯(lián)芐化合物片葉苔素D進(jìn)行了進(jìn)一步的藥代動(dòng)力學(xué)研究，獲得相關(guān)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，對(duì)藥物設(shè)計(jì)的合理性提供了必要信息。 1．快速篩選苔蘚植物中雙

3、聯(lián)芐類(lèi)化合物和對(duì)映-貝殼杉烷型二萜化合物。 通過(guò)電噴霧三級(jí)四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜（ESI-TQ-MS/MS）在正負(fù)兩種掃描模式下研究了苔蘚植物中雙聯(lián)芐類(lèi)化合物的質(zhì)譜行為，并采用LTQ線性離子阱質(zhì)譜（LTQ-FT-MS）在正離子掃描模式下進(jìn)行分析，以比較兩種不同型號(hào)的質(zhì)譜對(duì)其質(zhì)譜行為的影響。對(duì)于對(duì)映-貝殼杉烷型二萜化合物，由于其具有極性低、易揮發(fā)的特點(diǎn)，故采用GC-MS法對(duì)對(duì)映-貝殼杉烷型二萜的質(zhì)譜行為進(jìn)行了分析。通過(guò)以上研究，推斷、歸納

4、出了上述兩種類(lèi)型化合物的質(zhì)譜斷裂規(guī)律，并以此為指導(dǎo)對(duì)14種苔蘚植物以及墨綠葉苔分別進(jìn)行了雙聯(lián)芐類(lèi)化合物和對(duì)映-貝殼杉烷型二萜化合物的快速篩選。上述篩選方法檢測(cè)出許多未知化合物，并可通過(guò)斷裂規(guī)律推斷出可能的結(jié)構(gòu)。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果為進(jìn)一步進(jìn)行苔蘚植物的化學(xué)成分研究提供了豐富的信息，并為富含上述兩種成分的其他植物的快速篩選提供參考。 2．片葉苔素D的藥代動(dòng)力學(xué)研究。 采用LC/MS2方法，得到片葉苔素D及其代謝產(chǎn)物的二級(jí)質(zhì)譜特征。

5、結(jié)合元素組成分析，檢測(cè)到兩個(gè)葡萄糖醛酸結(jié)合產(chǎn)物。建立了快速測(cè)定灌胃給藥和靜脈注射給藥后大鼠血漿中原型片葉苔素D的LC-MS/MS方法，并通過(guò)酶水解法測(cè)定了片葉苔素D總量（原型加結(jié)合型），并計(jì)算出相關(guān)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。原型藥物和總量的達(dá)峰時(shí)分別為0．33和0．5±0．2 h，達(dá)峰濃度分別為313．5±147．3和2788．7±366．8 ng/mL，絕對(duì)生物利用度分別為10．6％和29．9％。結(jié)果表明片葉苔素D吸收迅速，但口服生物利用度相對(duì)較低