大鼠腰骶叢神經(jīng)損傷實驗?zāi)Ｐ徒⒌难芯?pdf

1、目的： 本實驗旨在建立一個準確、可靠的腰骶叢神經(jīng)損傷模型，并對其解剖及功能進行闡述。 研究方法： 1．大鼠腰骶叢神經(jīng)根與解剖標志之間的位置關(guān)系：神經(jīng)根定位的解剖標志取腎動脈根部、腸系膜后動脈根部、旋髂深動脈根部、髂總動脈分叉處。游標卡尺測量解剖標志平面與神經(jīng)根平面之間的垂直距離。具體測量為：①左側(cè)：腎動脈根部上緣平面與L2下緣平面的距離、腸系膜后動脈根部上緣平面與L1下緣平面的距離、旋髂深動脈根部上緣平面與L4下緣平面的距離

2、、髂總動脈分叉處下緣平面與L6下緣平面的距離。②右側(cè)：腎動脈根部上緣平面與L2下緣平面的距離、腸系膜后動脈根部上緣平面與L1下緣平面的距離、旋髂深動脈根部下緣平面與L5上緣平面的距離、髂總動脈分叉處下緣平面與L6下緣平面的距離。 2．刺激大鼠各腰骶叢神經(jīng)根后記錄下肢各肌肉神經(jīng)肌電圖：經(jīng)記錄完解剖數(shù)據(jù)大鼠，沿腹股溝中點、膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)中點及內(nèi)踝連線作切口，切開皮膚至皮下，并將皮膚剝離，顯露下肢肌肉。將刺激電極正極端置于神經(jīng)根近心端，負

3、極置于神經(jīng)根遠心端，接收電極正極插入下肢肌肉肌腹近心點、中點、遠心點，負極插入其肌腱處，接地電極聯(lián)于腹部切口皮下。將刺激電壓調(diào)至20mv，記錄肌電波幅及肌電圖，波幅值取其平均值。分別刺激L1-S1神經(jīng)根，記錄股直肌、股內(nèi)側(cè)肌、股外側(cè)肌、脛側(cè)廣肌、腓側(cè)廣肌、腓腸肌、長收肌、大收肌、脛前肌、趾長屈肌、腓骨長肌、臀大肌、股二頭肌長頭、比目魚肌的誘發(fā)電位值。所得數(shù)據(jù)經(jīng)正態(tài)性檢驗及方差齊性檢驗，采用多樣本t檢驗（Student's t-test）

4、，進行樣本間的兩兩比較。P<0.05為差異有顯著性，P>0.05為差異無顯著性。從而，確定各神經(jīng)有明顯支配作用的肌肉。 3．大鼠各腰骶叢神經(jīng)根性損傷實驗?zāi)Ｐ偷闹苽洌焊鶕?jù)所測大鼠腰骶叢神經(jīng)根與解剖標志之間的位置關(guān)系，確定大鼠腰骶叢神經(jīng)暴露的手術(shù)入路及計數(shù)方法。根據(jù)L1-S1神經(jīng)根的大體位置，分別取腹部上1／3、中1／3、下1／3正中縱形切口約4cm，將術(shù)野內(nèi)的腸管等腹膜內(nèi)臟器向?qū)?cè)牽開，于腹膜后找到各解剖標志，依解剖標志分離腰大肌

5、、脊間肌間隙，暴露深處目標腰骶叢神經(jīng)根，將暴露神經(jīng)部分切除約0.4cm，神經(jīng)遠斷端固定于周圍肌肉上。 4．大鼠腰骶叢神經(jīng)損傷后下肢運動功能的大體觀察和坐骨神經(jīng)功能指數(shù)的測定：實驗?zāi)Ｐ椭懈鹘M大鼠均于術(shù)后2周、4周、8周、12周各測量一次坐骨神經(jīng)功能指數(shù)SFI值。所得數(shù)據(jù)經(jīng)正態(tài)性檢驗及方差齊性檢驗，采用多樣本t檢驗（Student's t-test），進行樣本間的兩兩比較。P＜0.05為差異有顯著性，P＞0.05為差異無顯著性。

6、 結(jié)果：1．大鼠腰骶叢神經(jīng)根與解剖標志之間的關(guān)系：L1（右）位于腸系膜后動脈根部平面稍上方（0.306±0.101cm），L1（左）位于腸系膜后動脈根部平面稍上方（0.288±0.114cm）；L2（右）位于右腎動脈根部平面稍上方（0.219±0.056cm），L2（左）位于左腎動脈根部平面稍上方（0.212±0.074cm）；L5（右）位于右旋髂深動脈根部平面稍下方（0.098±0.035cm），L4（左）位于左旋髂深動脈根部平面

7、稍上方（0.276±0.022cm）；L6（右）位于髂總動脈分叉處平面稍下方（0.128±0.014cm），L6（左）位于髂總動脈分叉處平面稍下方（0.166±0.033cm）。 2．各組數(shù)據(jù)經(jīng)多樣本t檢驗兩兩比較，得出各神經(jīng)組，有明顯意義的肌肉。L1：各肌肉無有意義波幅，L2：股直肌、股內(nèi)側(cè)肌，L3：股直肌、股內(nèi)側(cè)肌、股外側(cè)肌，L4：脛前肌、股二頭肌長頭，L5：臀大肌、股二頭肌長頭，L6：腓骨長肌、臀大肌，S1：腓骨長肌、臀大

8、肌。 3．通過對大鼠腰骶叢神經(jīng)損傷模型坐骨神經(jīng)功能指數(shù)（SFI）的動態(tài)觀察，得出L4、L5及其匯合而成的腰骶干是坐骨神經(jīng)的恒定組份，L3、L6也參與坐骨神經(jīng)的組成，L1、L2、S1不參與坐骨神經(jīng)的組成。通過對SFI的動態(tài)觀察得出，大鼠作為較低等地哺乳動物，有著較強的神經(jīng)再生能力，故在涉及到腰骶叢L4、L5、腰骶干及L3、L6的神經(jīng)轉(zhuǎn)位、移植、神經(jīng)組織工程等實驗中應(yīng)盡量在8-12周內(nèi)，觀測各較精密指標，以防大鼠的神經(jīng)自我再生和代償