水稻雄性不育突變體的遺傳與定位分析.pdf

1、本實驗用60Coγ對粳稻(japonicacultivar.L)9522進行輻射誘變，得到一隱性單基因控制的雄性不育突變體。半薄切片和掃描電鏡觀察表明該突變體花藥在發(fā)育初期正常，在減數分裂后期開始出現異常，小孢子凹陷為空泡、萌發(fā)孔破裂、花藥外壁的結構異常。脂質含量測定結果發(fā)現突變體花藥角質總量明顯下降，單位面積角質單體含量中，長鏈脂肪酸下降最明顯。之前的研究已經使用圖位克隆的方法將突變體突變基因座位定位在4號染色體上的分子標記OS409

2、與XY409-3之間，橫跨15BAC克隆。通過全基因組重測序的方法將測序結果與野生型對比，發(fā)現在定位區(qū)間內有一區(qū)段疑似缺失，并且最終通過PCR擴增以及測序證實了突變體存在大片段缺失。為了研究造成突變體雄性不育表型的原因，我們對缺失片段內的基因進行篩選，通過表達模式分析、基因芯片分析、基因共表達分析、同源比對等方法初步篩選出三個候選基因:CYP87、HOTHEAD、CYP704。對候選基因分別構建互補載體，轉化到突變體中，進行互補實驗，目