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1、本文研究采用整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),建立我國(guó)臨床應(yīng)用最廣泛的關(guān)木通(AMK)所致大鼠急性腎損害模型,觀察AMK對(duì)大鼠腎上腺是否有毒效應(yīng)及其與腎損害之間的關(guān)系,并探討其可能機(jī)制。 方法健康成年Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠36只,按體重隨機(jī)分為6組:即給藥1d組,3d組,5d組及3個(gè)相應(yīng)對(duì)照組。按中藥傳統(tǒng)煎制方法制備AMK水煎劑并測(cè)定其總馬兜鈴酸含量,每日給藥2次,給藥劑量是40g·kg-1·d-1ig對(duì)照組給予等容量蒸餾
2、水。于給藥d2,4,6斷頭取血,處死動(dòng)物。觀測(cè)指標(biāo)包括:一般狀況觀察(生長(zhǎng)發(fā)育、外觀、反應(yīng)性、活動(dòng)性),腎上腺和腎臟的絕對(duì)重量與相對(duì)重量,腎上腺和腎臟組織學(xué)及其超微結(jié)構(gòu)變化,血清尿素氮(bloodureanitrogen,BUN),肌酐(serumcreatinine,Scr),血清皮質(zhì)醇含量,免疫組化法檢測(cè)8-羥基脫氧鳥苷(8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG)和誘生型一氧化氮合酶(induciblenitri
3、coxidesynthase,iNOS)的表達(dá)。 結(jié)果ig給予雌性大鼠40g·kg-1·d-1AMK水煎劑(相當(dāng)于總馬兜鈴酸劑量66mg·kg-1·d-1)3d后,腎上腺絕對(duì)重量和相對(duì)重量增大,血清皮質(zhì)醇明顯增高,病理組織學(xué)表現(xiàn)為腎上腺皮質(zhì)明顯增厚,束狀帶細(xì)胞漿充滿類脂質(zhì)空泡。電鏡表現(xiàn)為腎上腺皮質(zhì)束狀帶細(xì)胞胞漿中含豐富的線粒體,線粒體嵴呈空泡狀,含豐富的光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及大小不等的脂滴。連續(xù)給藥5d大鼠腎臟絕對(duì)重量和相對(duì)重量增大,血B
4、UN、Scr明顯增高,病理組織學(xué)檢查顯示腎小管上皮細(xì)胞水腫,變性,壞死,表明急性腎小管損害。電鏡顯示為腎小管基底膜腫脹,內(nèi)有電子致密物沉積,胞漿內(nèi)線粒體變形、腫脹,線粒體嵴腫脹、斷裂,部分微絨毛腫脹、斷裂。免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示給藥組大鼠腎上腺組織及腎組織8-OHdG和iNOS表達(dá)明顯。 結(jié)論AMK水煎劑40g·kg-1·d-1經(jīng)口給藥(以AA計(jì),相當(dāng)于66mg·kg-1·d-1)連續(xù)3d,既可引起腎上腺皮質(zhì)增生,連續(xù)給藥5d可引
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