補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯對(duì)雌性去勢(shì)大鼠生殖內(nèi)分泌及免疫功能的影響.pdf

1、目的：以切除育齡雌性大鼠雙側(cè)卵巢誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)卵巢功能早衰的動(dòng)物模型，通過藥理實(shí)驗(yàn)觀察該方對(duì)去勢(shì)雌鼠內(nèi)分泌、免疫功能及靶器官三個(gè)層面的影響，揭示“補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯”治療卵巢功能早衰的部分理論基礎(chǔ)、作用機(jī)理及治療效果，并著重從免疫學(xué)角度做進(jìn)一步觀察，探討IL-2及IL-8兩種細(xì)胞因子在實(shí)驗(yàn)性去勢(shì)大鼠模型體內(nèi)的分布改變，為將來進(jìn)一步研究提供堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。 方法：將3月齡SD雌性大鼠60只(體重200±30g)，喂養(yǎng)一周，并觀察大鼠陰道脫落細(xì)胞涂片

2、，確定實(shí)驗(yàn)大鼠有無正常動(dòng)情周期。兩周后，將所有有正常動(dòng)情周期的大鼠進(jìn)行手術(shù)，隨機(jī)取50只行雙側(cè)卵巢摘除術(shù)，余10只行假手術(shù)。術(shù)后一周，連續(xù)觀察去勢(shì)大鼠陰道脫落上皮細(xì)胞，連續(xù)5天CI＜50％為造模成功。確認(rèn)造模成立后，將去勢(shì)大鼠隨機(jī)分為補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯低劑量組、中劑量組、高劑量組和六味地黃丸陽(yáng)性藥物對(duì)照組，并與去勢(shì)空白組和假手術(shù)組做對(duì)照。連續(xù)分別灌胃給藥30天。末次給藥24小時(shí)后，給大鼠稱重、戊巴比妥鈉腹腔內(nèi)麻醉后心臟取血，不抗凝低溫靜置過夜，

3、低速離心后吸取血清。將大鼠解剖，完整取下子宮，分組標(biāo)號(hào)后以10％福爾馬林液固定。采用放射免疫分析方法對(duì)各組大鼠血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、促卵泡生成素(FSH)、白細(xì)胞介素2(IL-2)及白細(xì)胞介素8(IL-8)的水平進(jìn)行檢測(cè)；對(duì)各組大鼠體重及生殖器官重量的改變進(jìn)行比較；并進(jìn)一步做子宮組織切片，HE染色，于普通光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)分析，觀察子宮內(nèi)膜厚度、腺體數(shù)目及血管分布等指標(biāo)。 結(jié)果：手術(shù)組與假手術(shù)組大鼠比較E2、P

4、和IL-2、IL-8及子宮指數(shù)的水平明顯降低(P＜0.05)，F(xiàn)SH水平明顯升高(P＜0.05)，切片圖像分析子宮內(nèi)膜明顯萎縮(P＜0.05)，腺體數(shù)目減少(P＜0.05)；補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯低劑量組、中劑量組、高劑量組及六味地黃丸組與去勢(shì)空白組大鼠比較，E2和P的水平明顯增高(P＜0.05)，F(xiàn)SH水平降低(P＜0.05)；補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯各組與六味地黃丸組大鼠比較在改善激素水平方面無顯著差異(P＞0.05)。在免疫功能方面的觀察發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯中

5、劑量組與去勢(shì)空白組大鼠比較IL-2的水平明顯增高(P＜0.05)，六味地黃丸組與去勢(shì)空白組大鼠比較IL-2的水平改變無差別(P＞0.05)；補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯低劑量組、中劑量組、高劑量組與去勢(shì)空白組大鼠比較IL-8的水平明顯增高(P＜0.05)，六味地黃丸組與手術(shù)組大鼠比較IL-8的水平改變無差別(P＞0.05)；實(shí)驗(yàn)中分析IL-2的水平與IL-8的水平存在一定的線性相關(guān)性，且呈正相關(guān)(0＜r＜1，P＜0.05)。手術(shù)前各組大鼠體重比較無顯著差

6、異(P＞0.05)，實(shí)驗(yàn)后中藥高劑量組與去勢(shì)空白組、假手術(shù)組及六味地黃丸組大鼠比較體重顯著增加(P＜0.05)。與去勢(shì)空白組比較，補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯低劑量組及六味地黃丸子宮指數(shù)水平明顯增高(P＜0.05)；組織形態(tài)學(xué)觀察可見去勢(shì)空白組較假手術(shù)組子宮內(nèi)膜變薄(P＜0.05)，固有層中子宮腺體少(P＜0.05)、腺腔小；補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯各組較去勢(shì)空白組內(nèi)膜增厚((P＜0.05)，固有層中子宮腺體增多(P＜0.05)，血管豐富，從而明顯改善病理狀態(tài)下大鼠子

7、宮的形態(tài)結(jié)構(gòu)。 結(jié)論：①對(duì)生殖內(nèi)分泌的調(diào)節(jié)：補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯及六味地黃丸均能有效調(diào)節(jié)去勢(shì)大鼠生殖內(nèi)分泌功能，且兩者在此方面療效無顯著差異。②對(duì)免疫功能的調(diào)節(jié)：與六味地黃丸治療組比較，補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)湯能明顯上調(diào)去勢(shì)大鼠血清中IL-2及IL-8的含量，從而有效改善去勢(shì)大鼠的細(xì)胞免疫功能。通過本實(shí)驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn)，在去勢(shì)大鼠血清中IL-8含量下降，且與血清中IL-2的水平變化存在一定的正相關(guān)關(guān)系。③對(duì)子宮的作用：補(bǔ)腎養(yǎng)經(jīng)方可明顯增加去勢(shì)大鼠子宮指數(shù)，并