診斷超聲對人早孕絨毛DNA損傷作用.pdf

1、背景： 超聲是婦產科領域常用的診斷工具之一，已廣泛應用于早早孕的診斷及胚胎、胎兒的發(fā)育監(jiān)測和畸形篩查?；译A成像技術的進步使超聲能清晰的監(jiān)測卵泡、胚胎及胎兒的發(fā)育；體外胚胎移植卵泡針吸穿刺術需要在超聲直視下進行；陰道超聲能更好的觀察胚胎及胎兒的結構，而不受腹部皮膚、脂肪和肌肉組織的干擾；脈沖多普勒技術(PD)、彩色血流成像技術(CDFI)有效提高了早孕診斷的準確率；三維、四維超聲能觀察到常規(guī)二維超聲探察不到的切面．這些超聲新技術的

2、應用自然伴隨著超聲輸出功率的增加，達到一定水平后對生物組織會產生明顯的效應．與傳統(tǒng)的B型和M型技術相比，多普勒成像及測量技術輸出功率更高，而脈沖多普勒技術則是其中輸出功率最高的．目前一個爭論的焦點就是無妊娠并發(fā)癥的婦女在孕早期運用脈沖多普勒檢查到底是利大于弊還是弊大于利．歐洲超聲醫(yī)學和生物學聯(lián)盟(EFSUMB)對孕早期進行陰道超聲檢查的結論和建議是：由于缺乏長期的、大樣本的、重復性的調查研究，孕早期進行陰道超聲檢查的安全問題值得關注，必

3、須從純醫(yī)學的角度認為對胚胎和／或孕母有利才予以陰道超聲檢查．即使臨床認為有必要對胎兒行脈沖或彩色多普勒檢查，也要把輸出參數設為盡可能低． 超聲波引起的生物學效應主要是熱效應和空化效應，診斷超聲引起的溫度升高不超過生理體溫1.5℃臨床上可忽略熱效應的損傷，超過4℃持續(xù)5分鐘則具有潛在危險性。近年來，隨著超聲新技術的應用，超聲設備的輸出聲強大幅度增加，超聲產科應用的安全性問題受到了研究者極大的關注．胚胎發(fā)育是細胞分化組織誘導形態(tài)發(fā)生

4、和胚體整和等一系列生命現(xiàn)象組成的程序性表達過程，可分為胚前期(受精～14d)、器官形成期(15～56d)、胎兒期(57d～分娩)．孕早孕(尤其是器官形成期)胚胎對外界因素非常敏感，這個階段胚胎的改變不僅可能引起宮內生長異常，胎兒死亡等，最重要的可能是引起出生后遲發(fā)性疾病發(fā)生的根源，且隨著胎兒生長，胎兒骨化越明顯，產生熱效應的可能增加．這些年來國內外許多學者對此做了相關性研究，但是對超聲應用的安全性問題仍有許多尚待解決(1)既往研究都是以

5、動物試驗和離體試驗為主，也有部分是流行病學調查，而并非直接以人體胚胎作為研究對象；(2)從形態(tài)學和生物化學方面研究診斷超聲對胚胎組織的影響，是目前主要手段和方法，分子生物學水平的研究很少(3)超聲輸出劑量、試驗條件和試驗方法的不一致導致試驗結果的多樣性，甚至得出相反的結論．本研究擬采用人體早孕絨毛組織作為研究對象，以細胞核內γH2AX含量作為檢測DNA損傷的敏感指標，評價一定劑量的超聲輻射對人體器官形成期胚胎的DNA損傷作用，并進一步評

6、價損傷的可修復性． 材料與方法： 對擬進行人工流產的90例早孕(42～56天)婦女隨機分為5組：I組(20例，對照組)、Ⅱ組(20例，5分鐘組)、Ⅲ組(20例，10分鐘組)、Ⅳ組(20例，20分鐘組)，V組(10例，20分鐘，輻射48小時后行人工流產術)．應用Acuson Aspen彩色多普勒超聲儀(Ispta=13mW／cm2,Isppa=52 mW／cm2)對孕囊進行不同時間的定點照射，前四組輻射后1小時內取材，第五

7、組輻射后48小時取材．用免疫組織化學技術檢測上述各組絨毛細胞γH2AX蛋白表達情況． 結果： 各實驗組的絨毛滋養(yǎng)層細胞γH2AX表達率均升高，各組表達率分別為(16.42±2.87)％ (16.63±3.74)％， (23.66±5.28)％， (40.26±9.43)％， (17.31±6.07)％。對照組(Ⅰ組)與輻射5分鐘組(Ⅱ組)間無顯著差異(P>O．05)；對照組與輻射10分鐘組(Ⅲ組)、輻射20分鐘組(Ⅳ組)

8、間有顯著差異(P<0.01)；輻射20分鐘組與修復組(Ⅴ組)間有顯著差異(P<0.01)；修復組與對照組間無顯著差異(P>0.05)． 結論： 1.以γH2AX作為標記物，診斷超聲可引起人早孕絨毛DNA損傷 2.診斷超聲輻射5分鐘不會引起人早孕絨毛DNA損傷 3.診斷超聲引起的DNA損傷具有時間依賴性 4.診斷超聲引起的DNA損傷至少可以部分被修復 5.診斷超聲引起的DNA損傷48小時后可