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1、引言: 在西方社會(huì)和我國(guó),冠心病(CHD)已成為目前嚴(yán)重危害人民健康、影響生活質(zhì)量的重要威脅之一。低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)的氧化作用被認(rèn)為在動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展中發(fā)揮著舉足輕重的作用。研究顯示,與HDL相關(guān)的對(duì)氧磷脂酶-1(PON1)能夠阻止LDL和HDL的氧化。長(zhǎng)期以來(lái),作為動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)預(yù)測(cè)因子,PON1已被反復(fù)進(jìn)行過(guò)研究。大量實(shí)驗(yàn)已證明,PON1與心血管疾病以及動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生呈負(fù)相關(guān)。但是上述實(shí)
2、驗(yàn)大多為橫斷面調(diào)查研究,關(guān)于PON1在心血管疾病中的動(dòng)態(tài)演變規(guī)律,尤其是在接受標(biāo)準(zhǔn)化治療的急性冠脈綜合征(ACS)患者中的演變規(guī)律,目前報(bào)道尚不多。 研究目的: 本次實(shí)驗(yàn)中,我們將研究在接受標(biāo)準(zhǔn)化治療的ACS患者中血清PON1活性的演變規(guī)律,同時(shí)分析它與其他脂質(zhì)的關(guān)系,以此評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)化治療對(duì)冠心病患者血清PON1活性的影響和意義,并探討其與HDL的深層次關(guān)系。 材料與方法: 1、研究對(duì)象: 參照19
3、79年wHO發(fā)表的《冠心病命名和診斷標(biāo)準(zhǔn)》和《內(nèi)科學(xué)(第六版)》關(guān)于ACS的定義,抽取2007年9月至2008年2月在中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院心臟監(jiān)護(hù)病房和心內(nèi)科病房收治的ACS患者115例,研究其血清PONl活性的演變;同時(shí)選取2008年3月在該醫(yī)院體檢中心進(jìn)行健康檢查者和本院職工53例作為對(duì)照。 2、研究方法: (1)觀察時(shí)間首先記錄所有實(shí)驗(yàn)對(duì)象的基線資料,分別于患者診斷為ACS并開(kāi)始治療后的第1天、第7天、第14天和第
4、28天各抽血一次進(jìn)行研究,檢測(cè)血清PON1活性和相關(guān)脂質(zhì)的濃度。 (2)干預(yù)因素在治療方案中,藥物的使用從入院第1天即開(kāi)始,至少持續(xù)到接受末次隨訪之時(shí)(低分子肝素除外)。所有患者均服用拜阿司匹林腸溶片和氯吡格雷。同時(shí)使用低分子肝素、β受體阻滯劑、ACEI和他汀類(lèi)制劑。所有患者均被建議戒煙和長(zhǎng)期進(jìn)行低脂、低熱量飲食。 (3)樣本采集和初步處理ACS患者空腹后,囑其取臥位,通過(guò)肘靜脈采血,每次抽3ml血標(biāo)本,用不含EDTA的
5、SST黃頭管盛裝,作血脂檢測(cè);另外3ml用1.5mlEP管盛裝,作PON1活性檢測(cè)。準(zhǔn)備進(jìn)行PON1活性檢測(cè)的血標(biāo)本被采集后,迅速使用低溫離心機(jī)于-4℃、4500rpm/min狀態(tài)下離心10分鐘,取其上清液并分裝于1.5mlEP管中,放置于-80℃低溫冰箱中凍存以備統(tǒng)一檢測(cè)。 (4)血脂的檢測(cè)血標(biāo)本采集后立即送我院檢驗(yàn)科進(jìn)行檢測(cè)。從第1天至第28天,所有的脂質(zhì)數(shù)據(jù)(包括HDL、LDL、apoAl、總膽固醇、甘油三酯)根據(jù)檢驗(yàn)室的
6、化驗(yàn)報(bào)告進(jìn)行及時(shí)記錄。 (5)PON1活性的檢測(cè)PON1的活性是使用乙酸苯酯作為底物進(jìn)行測(cè)量的。反應(yīng)緩沖液為含2 mmol/L CaCl2的50 mmol/L Tris-醋酸,pH值為8.0。將乙酸苯酯用無(wú)水乙醇以1:10稀釋后,取該稀釋液6μ1與1ml反應(yīng)緩沖液混勻組成底物液。取血清標(biāo)本1.5μl與150μl底物液反應(yīng),其后使用酶標(biāo)儀于270nm比色,測(cè)定5分鐘內(nèi)吸收值的變化0.D270。用0.D270乘以克分子消光系數(shù)即求出
7、酶的活性。 (6)統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)均描述為均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S),統(tǒng)計(jì)分析通過(guò)SPSS軟件進(jìn)行。計(jì)量資料用t檢驗(yàn)或方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì),計(jì)數(shù)資料用X2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。P<0.05被認(rèn)為差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果: 1、ACS組第1天的血清HDL濃度明顯低于對(duì)照組(0.98±0.29mmol/L比1.56±0.36mmol/L,P<0.05)。直到第28天,與第1天相比,血清HDL的濃度并沒(méi)有明顯的改變。 2、ACS組第1天
8、的血清apoA1濃度明顯低于對(duì)照組(0.95±0.18 g/1比1.60±0.20g/l,P<0.05)。直到第28天,與第1天相比,血清apoA1濃度并沒(méi)有明顯的改變。 3、ACS組第1天的血清LDL濃度明顯高于對(duì)照組(4.38±0.50mmol/L比2.80±0.48mmol/L,P<0.05)。相對(duì)于第1天的血清LDL濃度,第7天和第14天的血清LDL濃度并沒(méi)有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差別,直到第28天,血清LDL的水平才較第1天的明
9、顯降低(3.62±0.54mmol/L比4.38±O.50mmol/L,P<0.05)。 4、ACS組第1天的血清總膽固醇濃度明顯高于對(duì)照組(6.68±0.62mmol/L3.75±0.78mmol/L,P<0.05)。直到第14天,膽固醇濃度才比第1天的明顯下降(6.18±0.64mmol/L比6.68±0.62mmol/L,P<0.05)。 5、 ACS組第1天的血清甘油三酯濃度相對(duì)于正常對(duì)照組并沒(méi)有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異
10、。相對(duì)于第1天的甘油三酯濃度,第7天、第14天和第28天的甘油三酯濃度也沒(méi)有明顯的改變。 6、 ACS組第1天血清PON1活性明顯低于對(duì)照組(87±3μmol·min-1·mL-1比105±8μmol·min-1·mL-1,P<0.05),在該組患者中,PON1的活性在第1天和第7天兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)之間并沒(méi)有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。標(biāo)準(zhǔn)化治療對(duì)ACS患者PON1活性表現(xiàn)出顯著的提升作用開(kāi)始于第14天。從第1天的87±3μmol·min-1·
11、mL-1到第14天的92±5μmol·min-1·mL-1,再到第28天的95±7μmol·min-1·mL(P<0.05)。 7、我們還比較了使用阿托伐他汀、辛伐他汀和氟伐他汀的患者在各觀察時(shí)間點(diǎn)的血清PON1活性的差異。在任何一個(gè)時(shí)間點(diǎn)的任何兩個(gè)他汀組之間,我們并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)血清PON1活性有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 8、在接受PCI和未進(jìn)行PCI的兩個(gè)組之間,我們也比較了血清PON1活性的差異。在任何一個(gè)時(shí)間點(diǎn),兩組
12、之間并沒(méi)有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 結(jié)論: 1、ACS患者血清PON1活性低于正常人。 2、ACS患者在接受標(biāo)準(zhǔn)化治療兩周之后,血清PON1活性開(kāi)始出現(xiàn)上升。 3、ACS患者在接受標(biāo)準(zhǔn)化治療4周內(nèi),血清HDL和apoA1濃度并沒(méi)有呈現(xiàn)出上升的變化趨勢(shì)。血清PON1活性的演變可能獨(dú)立于HDL,和apoA1濃度變化的機(jī)制。 4、PON1活性的演變印證了它在抗動(dòng)脈粥樣硬化中的作用。 5
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