瘦素受體基因變異與乳腺癌相關(guān)性研究.pdf

1、目的：探討瘦素受體基因exon4、exon6、exon9、exon20變異與乳腺癌的關(guān)系，探討乳腺癌的遺傳易感性，確定易感基因和保護基因。 方法：以2004年8月至2005年8月在山西省腫瘤醫(yī)院乳腺科進行手術(shù)治療的乳腺癌患者46例、良性病患者15例，同期在山西省腫瘤醫(yī)院健康體檢中心進行體檢的健康人60例為研究對象，收集患者的臨床資料，采集患者的病灶、灶旁組織標本和靜脈血標本，健康對照的靜脈血標本，進行如下研究：①用體外擴增測序的

2、方法檢測20例乳腺癌組織、癌旁組織和血中exon4、exon6、exon9、exon20的變異情況；②采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性內(nèi)切酶片段多態(tài)性(PCR-RFLP)技術(shù)，檢測乳腺癌組織、良性病組織和健康對照人群中瘦素受體基因exon6變異位點的等位基因型分布及頻率，分析其與乳腺癌的關(guān)系；③用半巢式聚合酶鏈反應(yīng)-限制性內(nèi)切酶片段多態(tài)性(snPCR-RFLP)技術(shù)，檢測乳腺癌組織、良性病組織和健康對照人群中瘦素受體基因exon20兩個變異位點

3、的等位基因型分布及頻率，分析其與乳腺癌的關(guān)系；④用聚合酶鏈反應(yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性(PCR-SSCP)技術(shù)，檢測乳腺癌組織、良性病組織和健康對照人群中瘦素受體基因exon4和exon9的變異情況，分析其與乳腺癌的關(guān)系；⑤資料輸入SPSS11.0forwindows統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計分析，計算各指標的陽性率、四格表χ2、Fisher確切概率、OR值及OR95％可信區(qū)間，多因素分析用非條件logistic回歸模型分析。 結(jié)果：1.20例

4、乳腺癌患者中，有16例(80％)在第六外顯子的668核苷酸位點處發(fā)生了A→G的堿基顛換，導(dǎo)致Gln223Arg；3例(15％)在第九外顯子1029核苷酸位點發(fā)生了T→C的堿基置換，致使Ser343Ser；在第二十外顯子2927核苷酸位點處，全部發(fā)生了C→A的堿基變異，使Ala976Asp；在3057核苷酸位點處有15例(75％)發(fā)生了G→A的堿基顛換，即Pro1019Pro。 2.經(jīng)PCR-RFLP檢測，Gln223Arg各基因

5、型的分布頻率在健康對照組與乳腺癌組、良性病組與乳腺癌組之間均無顯著性差異(χ2=3.796,P=0.704)；等位基因A、G的分布頻率在健康對照組與乳腺癌組、良性病組與乳腺癌組之間均無顯著性差異(χ2=1.959，P=0.581)。3.半巢式PCR產(chǎn)物酶切技術(shù)檢測結(jié)果，Pro1019Pro各基因型在乳腺癌組織、良性病組織和健康對照組中分布有顯著差異。等位基因A和G的分布頻率在良性病組與乳腺癌組無顯著性差異；健康對照組與乳腺癌組之間有顯著

6、性差異(P＜0.05)。 4.Ala976Asp在所觀察人群中，發(fā)生100％的變異；第4外顯子沒有發(fā)生位點變異。5.經(jīng)PCR-SSCP檢測，Ser343Ser各基因型的分布頻率在健康對照組與乳腺癌組、良性病組與乳腺癌組之間均無顯著性差異(χ2=6.891，P=0.903)；等位基因A、G的分布頻率在健康對照組與乳腺癌組、良性病組與乳腺癌組之間均無顯著性差異(χ2=3.957,P=0.751)。 結(jié)論：根據(jù)統(tǒng)計結(jié)果，瘦素受