131I標(biāo)記抗NRP-1單克隆抗體在荷膠質(zhì)瘤裸鼠體內(nèi)分布和SPECT-CT顯像研究.pdf

1、廈門大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨立完成的研究成果。本人在論文寫作中參考其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當(dāng)方式明確標(biāo)明，并符合法律規(guī)范和《廈門大學(xué)研究生學(xué)術(shù)活動規(guī)范( 試行) 》。另外，該學(xué)位論文為( ) 課題( 組)的研究成果，獲得( ) 課題( 組) 經(jīng)費或?qū)嶒炇业馁Y助，在( 耐虹粥砰) 實驗室完成。( 請在以上括號內(nèi)填寫課題或課題組負(fù)責(zé)人或?qū)嶒炇颐Q，未有此項聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲

2、明。)聲明人( 簽名) ：主日柳7 。f 妒年g 月k 日摘要背景介紹放射免疫顯像( r a d i o i m m u n o i m a g i n e ，R I D 在腫瘤早期診斷中占據(jù)重要地位，F(xiàn) D A 已經(jīng)批準(zhǔn)了五種基于R I I 抗體藥物用于臨床腫瘤顯像。但目前，現(xiàn)有靶點的R 1 1 分子探針面臨腫瘤顯像探測效能不足，并存在假陰性等諸多難題。開發(fā)針對新靶點的分子探針，是R I I 不斷發(fā)展成熟的關(guān)鍵所在。神經(jīng)鞭毛素受體．1

3、( n e u r o p i l i n - 1 ，N R P - 1 ) ，是S c m a p h o d n 3 A 和血管內(nèi)皮生長因子( V E G F ) 的共受體，參與腫瘤血管新生，腫瘤生長和轉(zhuǎn)移。它在多種腫瘤組織中高表達(dá)，并與腫瘤的惡性程度密切相關(guān)，被認(rèn)為是一個很有前景的腫瘤顯像與治療靶點。但目前針對N R P ．1 靶點分子顯像，尚缺乏有效的特異性探針，為了發(fā)展靶向N R P ．1的靶向顯像藥物，我們實驗室前期通過雜交

4、瘤技術(shù)制備了一株靶向N R P ．1 的功能性單克隆抗體一A 6 ，本課題擬采用碘1 3 1 標(biāo)記的抗神經(jīng)鞭毛素抗體( 1 3 1 I - A 6 - M A b ) 做為分子探針，探討1 3 1 I ．A 6 ．M A b 體外特性、在荷瘤裸鼠中的生物學(xué)分布特征及其靶向顯像特性。實驗方法( 1 ) 我們通過用r P r o t e i n A 親和柱純化將抗N R P ．1 抗體從小鼠腹水中純化，并且通過S D S ．P A G E

5、鑒定抗體的純度，E L I S A 方法鑒定抗體的親和力。( 2 ) 采用I o d o g c n 法標(biāo)記碘1 3 1 和抗神經(jīng)鞭毛素( N e u r o p i l i n - 1N R P —1 ) 單克隆抗體，制備1 3 1 I - A 6 ．M A b 探針，凝膠柱分離法純化1 3 1 I ．A 6 ．M A b 探針，放射性紙層析法( T L C ) 鑒定1 3 1 I - A 6 ．M A b 放化純度，E l i s

6、a 法鑒定”1 I ．A 6 ．M A b 免疫活性，體外觀測法鑒定”1 I ．A 6 ．M A b 穩(wěn)定性。( 3 ) 選用U 8 7 膠質(zhì)瘤細(xì)胞株，采用細(xì)胞攝取實驗測定探針結(jié)合特異性，飽和結(jié)合實驗測定探針結(jié)合力，細(xì)胞內(nèi)吞實驗測定探針內(nèi)吞速率。( 4 ) 建立人膠質(zhì)瘤U 8 7 細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤模型，隨機(jī)分為4 組，每組4 只，通過尾靜脈注射1 3 1 I ．A 6 ．M A b7 ．4 M B p 與未標(biāo)記抗體( 0 、2 ．5