西羅莫司自微乳化釋藥系統(tǒng)的研究.pdf

1、西羅莫司（Sirolimus，SRL）是一種新型大環(huán)內(nèi)酯類免疫抑制劑，其與FK506蛋白FKBP-12)結(jié)合形成西羅莫司-FKBP-12復合物，后者再與哺乳類動物的西羅莫司靶點Mammalian target of rapamycin，mTOR)結(jié)合，阻斷T淋巴細胞及其他細胞由G1期至S期的進程，從而發(fā)揮免疫抑制效應。進一步的研究發(fā)現(xiàn)SRL獨特的作用機制還可使其成為一種化療藥物用于抗腫瘤，如乳腺癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、腎細胞瘤等。雖然SR

2、L顯示出較好的藥理活性，然而由于其水中溶解度低及對胃酸敏感，加之其在腸壁和肝中被CYP3A4同功酶廣泛代謝，且又是P-gp的底物導致其口服劑型生物利用度較低，如臨床常用口服液及納米結(jié)晶片的平均生物利用度均低于20％。
　　 本文研制了西羅莫司自微乳化藥物遞送系統(tǒng)（SMEDDS），并以市售口服液制劑為對照，對SRL-SMEDDS的處方工藝、理化性質(zhì)、體外分散、腸吸收機理以及大鼠體內(nèi)藥物動力學進行了研究。首先建立了溶媒及SMEDDS

3、制劑中西羅莫司含量的HPLC分析方法、分散介質(zhì)中和腸灌流液中藥物濃度的HPLC測定方法以及大鼠體內(nèi)全血樣品中藥物濃度的HPLC /MS/MS測定方法。結(jié)果表明采用選定的色譜或質(zhì)譜條件測定西羅莫司的體內(nèi)外樣品含量，峰形較好，空白基質(zhì)對藥物測定無影響；主成分峰分離較好，靈敏度高，專一性強，測定結(jié)果穩(wěn)定準確。以溶解度實驗、相溶性和自乳化效率實驗、偽三元相圖繪制以及藥物的穩(wěn)定性考察等確定了SRL-SMEDDS的處方成分，即MCT為油相，Crem

4、ophor RH40為表面活性劑，丙二醇為助溶劑。采用二因素五水平星點設計-效應面優(yōu)化法對西羅莫司SMEDDS處方進行了優(yōu)化，所建數(shù)學模型取得了良好的預測效果，確定SRL-SMEDDS處方的油相質(zhì)量百分比（X1）和表面活性劑與助溶劑質(zhì)量比（X2）的優(yōu)選范圍分別為25~30％和2.0~3.0。優(yōu)選處方體外快速分散后生成粒徑小于50nm的微乳；與原料藥相比，微乳可使藥物在pH 1.2 HCl溶液中的半衰期延長近4倍，在pH6.8的磷酸鹽緩沖

5、液中的半衰期延長近9倍。此外，助溶劑在制劑中不僅發(fā)揮著增溶藥物的作用，而且還可顯著提高了SMEDDS的分散速率。采用單向灌流法考察了西羅莫司微乳在大鼠體內(nèi)的腸吸收特征，并對西羅莫司微乳的最佳吸收部位和吸收機制進行了初步探討。西羅莫司自微乳化制劑吸收速率常數(shù)不受藥物質(zhì)量濃度的影響而與灌流速度和大鼠腸段不同吸收部位有關(guān)；膽汁分泌和排泄在本實驗條件下不影響藥物腸道吸收；藥物在大鼠小腸主要通過被動擴散方式吸收；西羅莫司微乳在整個腸段均有吸收，其

6、中以回腸吸收最好，且全腸吸收效果優(yōu)于市售西羅莫司口服液（Rapamune(R)）?？疾炝舜笫蠊辔附o予市售Rapamune(R)口服液以及SRL-SMEDDS后的體內(nèi)藥動學行為。相對于市售口服液制劑，SMEDDS的達峰時間短、達峰濃度高、相對生物利用度可達217.59％；經(jīng)統(tǒng)計學分析，二者Cmax、tmax和AUC0→48h均具有顯著性差異(P<0.05)；可見將SRL制成自微乳化制劑后可顯著提高藥物的口服吸收。通過聯(lián)用乳糜微粒流阻塞技術(shù)

7、和在體單向腸灌流技術(shù)評價西羅莫司SMEDDS的藥物腸道淋巴轉(zhuǎn)運，同時還考察了淋巴轉(zhuǎn)運對大鼠口服生物利用度的影響。研究結(jié)果顯示淋巴轉(zhuǎn)運對西羅莫司自微乳化制劑口服生物利用度的影響顯著。在各SMEDDS成分中，油相顯著影響藥物經(jīng)淋巴轉(zhuǎn)運的腸道吸收，并呈現(xiàn)一定的劑量依賴性；對于不含油相的對照制劑，藥物吸收基本不通過淋巴轉(zhuǎn)運；口服藥物淋巴轉(zhuǎn)運的啟動需要一定量脂質(zhì)的支持。此外，雖然較小的微乳粒徑和較高表面活性劑含量也能一定程度上提高藥物的吸收，但其