堿基切除修復(fù)基因與乳腺癌診斷及預(yù)后的價(jià)值研究.pdf

1、目的：
　　堿基切除修復(fù)(BER)在DNA修復(fù)機(jī)制中有著重要作用，普遍存在于從細(xì)菌到人類(lèi)的各個(gè)生物界中，負(fù)責(zé)修復(fù)細(xì)胞內(nèi)每天產(chǎn)生的數(shù)以萬(wàn)計(jì)的DNA損傷，包括活性氧物質(zhì)、烷化劑及電離輻射引起的DNA堿基損傷。大量研究發(fā)現(xiàn)，堿基切除修復(fù)的不足或缺失將引起細(xì)胞內(nèi)損傷的累積，導(dǎo)致基因的缺失或突變，且其關(guān)鍵修復(fù)基因多態(tài)性位點(diǎn)也被報(bào)道在各人群中與多種腫瘤發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。本研究在中國(guó)人群中從基因和蛋白兩個(gè)水平探討堿基切除修復(fù)通路中的關(guān)鍵基因在乳腺癌

2、發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮的重要作用，進(jìn)一步明確其表達(dá)特征以及易感人群的主要特征，為提高乳腺癌的藥物敏感性提供充分的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)，從而更有利于易感人群的篩選和乳腺癌治療的優(yōu)化。
　　方法：
　　課題主要分為兩個(gè)部分。第一部分收集194例乳腺癌患者與245例健康對(duì)照，采集其外周血，提取出DNA，采用兩對(duì)引物-聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase chain recation withconfronting two-pair prime

3、rs，PCR-CTPP)技術(shù)分析BER通路中三個(gè)重要修復(fù)基因的四種單核苷酸多態(tài)性（APE1 Asp148Glu，promotor-141T/G，OGG1 Ser326Cys和XRCC1Arg399Gln），統(tǒng)計(jì)分析其與乳腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)系;第二部分采用免疫組化方法對(duì)60例三陰乳腺癌組織中APE1、PARP1和BRCA1表達(dá)進(jìn)行染色分析，觀察這三種蛋白在三陰乳腺癌組織中的表達(dá)特征，分析其表達(dá)水平與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性。
　

4、　結(jié)果：
　　在乳腺癌中，XRCC1Arg/Gln雜合基因型或XRCC1Gln/G ln純合突變基因型與XRCC1Arg/Arg純合野生基因型相比，顯著增高個(gè)體乳腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(校正OR=1.529;95％CI:1.012～2.310; P=0.044);(校正OR=2.189;95％CI:1.063～4.507; P=0.033)，在BMI724kg/m2的人群中，攜帶OGG1S er/Cys基因型和OGG1Cys/Cys基因型顯

5、著降低乳腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)在(OR=0.426，95％CI=.200～0.905，P=0.027; OR=0.323，95％CI=0.146～0.715，P=0.005)，在絕經(jīng)后的人群中，攜帶XRCC1Arg/Gln雜合基因型的個(gè)體乳腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)明顯增高(OR=1.848，95％CI=.1.084～3.153，P=0.024)，多基因SNP位點(diǎn)聯(lián)合作用與乳腺癌易感性分析發(fā)現(xiàn)，相比無(wú)危險(xiǎn)基因型的個(gè)人，攜帶兩個(gè)及以上危險(xiǎn)基因型的個(gè)體，換乳腺癌

6、的風(fēng)險(xiǎn)顯著增高(OR=2.183，95％CI=1.095～4.353，P=0.027)。第二部分研究發(fā)現(xiàn)，PARP1表達(dá)在腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的分組中明顯差異，在腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性的癌組織中表達(dá)明顯高于腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性組，P=0.009，APE1和BRCA1兩者表達(dá)在組織分化的分組間存在差異，APE1在分化差的癌組織中表達(dá)增高(P=0.027)，BRCA1表達(dá)降低(P=0.017);其癌組織中，APE1與PARP1表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.28

7、4，P=0.028），壽命表分析提示，APE1陽(yáng)性表達(dá)患者的三年生存率明顯低于陰性表達(dá)的患者(P=0.021)，且APE1和PARP1均陽(yáng)性患者三年生存率相比共表達(dá)陰性患者更低(P=0.032)，在三陰乳腺癌中，年齡、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織分化差以及APE1陽(yáng)性表達(dá)是其獨(dú)立的預(yù)后因子，顯著降低患者生存時(shí)間。
　　結(jié)論：
　　XRCC0Arg399Gln多態(tài)性與乳腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)， OGG1 Ser326Cys多態(tài)性在BMI72