載多西紫杉醇脂質(zhì)微泡制備及對人肝癌HepG2細胞抑制作用體外實驗研究.pdf

1、目的：原發(fā)性肝癌是危害人類生命健康最常見的惡性腫瘤之一,由于發(fā)病隱匿,惡性程度高,易發(fā)生浸潤和轉(zhuǎn)移,發(fā)現(xiàn)時大多已經(jīng)是中晚期,失去手術(shù)治療的機會,目前迫切需要尋找到行之有效的治療方法。超聲介導的微泡靶向治療是近年來研究的熱點。本實驗通過制備載多西紫杉醇脂質(zhì)微泡,并通過體外實驗考察此微泡聯(lián)合超聲對人肝癌HepG2細胞的增殖抑制及誘導凋亡作用,探索靶向治療肝癌的可行性和有效性。
　　方法：本實驗采用磷脂類化合物為膜材料,包裹氣體選擇C3

2、F8,藥物為多西紫杉醇,采用薄膜水化法制備載藥超聲微泡。以包封率為指標,通過單因素考察磷脂與多西紫杉醇藥物的比例,磷脂與膽固醇的比例、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的溫度、水化的溫度和時間、機械震蕩的時間篩選出最佳制備工藝;掃描電鏡和透射電鏡觀察微泡形態(tài)及檢測粒徑大小,HPLC法檢測包封率和載藥量,4℃和25℃條件下考察其穩(wěn)定性,超聲觀察體內(nèi)顯影效果。體外實驗中,采用CCK-8法檢測多西紫杉醇對人肝癌HepG2細胞的生存影響;CCK-8法檢測各實驗組對細胞的

3、增殖抑制作用;倒置顯微鏡觀察各實驗組細胞凋亡情況;流式細胞儀檢測各實驗細胞的周期及凋亡;透射電鏡觀察各實驗組細胞的微結(jié)構(gòu)變化。
　　結(jié)果：載多西紫杉醇脂質(zhì)微泡外形圓整,分散好,無黏連,大小均勻,粒徑范圍在200~650nm之間;包封率為(85.72±2.68)％,載藥量為(14.29±1.17)%;4℃條件下保存10d性質(zhì)穩(wěn)定,其粒徑在230~700nm之間;包封率為(80.25±2.26)%,載藥量為(13.37±1.13)%;

4、體內(nèi)造影中超聲微泡能夠增強顯影效果,增大超聲儀MI微泡能順利被擊碎。體外實驗結(jié)果顯示:多西紫杉醇能明顯影響人肝癌HepG2細胞的生存,且細胞的存活率與藥物濃度和作用時間呈量效關(guān)系。載多西紫杉醇脂質(zhì)微泡聯(lián)合超聲對人肝癌HepG2細胞增殖抑制和凋亡誘導作用較其他實驗組更顯著。單純使用載多西紫杉醇脂質(zhì)微泡對人肝癌HepG2細胞沒有明顯增殖抑制和誘導凋亡作用,且此微泡只有在超聲作用下才能導致微泡內(nèi)藥物的釋放。
　　結(jié)論：載多西紫杉醇脂質(zhì)微