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1、本研究以不同來(lái)源食品中分離得到的27株細(xì)菌和35株酵母為材料,通過(guò)清除DPPH自由基與抑制脂質(zhì)過(guò)氧化兩種方法,篩選高抗氧化活性菌株;隨后經(jīng)清除·OH-和·O2-、測(cè)定還原能力、耐H2O2存活力等試驗(yàn)進(jìn)一步分析了抗氧化性能。此外,我們就篩選得到菌種的培養(yǎng)基組成進(jìn)行了正交優(yōu)化,并探討了其耐受消化道環(huán)境的能力。主要研究結(jié)果如下: (1)通過(guò)清除DPPH自由基和抑制脂質(zhì)過(guò)氧化兩種方法,從27株細(xì)菌和35株酵母中篩選得到高抗氧化活性菌株:
2、B2、B3、B4(細(xì)菌),Y6、Y7(酵母)。 (2)抗氧化性能進(jìn)一步分析: a.B2~B4菌體:在清除羥自由基方面,清除率分別為59.8%、61.0%、64.6%,均高于對(duì)照組0.01%Vc(17.2%);清除超氧自由基能力偏低,清除率分別為4.2%、4.8%、8.3%;抑制脫氧核糖氧化損傷方面,抑制率分別為44.8%、54.7%、56.5%;還原能力均高于100μmol/L半胱氨酸的量(分別相當(dāng)于123.3μmol
3、/L、108.7μmol/L、110.2μmol/L);1mmol/L H2O2的環(huán)境中,B2~B4的存活能力遠(yuǎn)高于保加利亞乳桿菌。另外,B2、B3、B4完整菌體表現(xiàn)出的清除羥自由基、超氧自由基和抑制脫氧核糖氧化損傷的能力對(duì)比,這3者趨勢(shì)一致:B4>B3>B2。 b.Y6、Y7發(fā)酵液:清除羥自由基能力很高,分別為69.4%和92.3%,遠(yuǎn)高于0.01%Vc的17.2%;超氧自由基清除率同樣不高,分別為13.4%、23.1%,其
4、中Y7發(fā)酵液清除率高于對(duì)照組0.01%Vc(14.7%);還原能力卻不及供試細(xì)菌菌體,相當(dāng)于18.0、61.1μmol/L的半胱氨酸的量;對(duì)脫氧核糖氧化損傷的抑制作用明顯,抑制率為83.5%和89.8%;且黃酮類(lèi)化合物含量為87.4和106.6μg/ml。綜合各項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果Y7發(fā)酵液的抗氧化活性要高于Y6發(fā)酵液。 (3)經(jīng)過(guò)對(duì)B2~B4培養(yǎng)基的正交優(yōu)化,得到最優(yōu)的配比: B2菌:每100ml培養(yǎng)基中,麩皮0.9g,豆餅粉
5、1g,NaCl0.8g,PH7.5。B3菌:每100ml培養(yǎng)基中,麩皮0.9g,豆餅粉0.5g,CaCl20.4g,PH6.5。B4菌:每100ml培養(yǎng)基中,馬鈴薯淀粉0.6g,豆餅粉1.5g,CaCl20.8g,PH6.5。 (4) B2~B43株菌有一定的耐受消化道環(huán)境的能力。在75g/L的高鹽濃度下,B2~B4活菌體依然可以存活,B4甚至在80g/L的濃度下存活。在膽汁鹽的耐受方面,除B3外,B2、B4在3g/L鹽濃度下可
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