尼麥角林的結(jié)構(gòu)確證、原料藥和注射劑的質(zhì)量控制及其在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、本文采用UV、IR、MS、NMR并結(jié)合理化性質(zhì)對(duì)尼麥角林結(jié)構(gòu)進(jìn)行了確證，同時(shí)經(jīng)熱分析、元素分析、MS等證實(shí)，本品純度符合原料藥要求。自行研究合成尼麥角林代謝物1-MMDL，通過(guò)MS、1H-NMR證實(shí)其結(jié)構(gòu)為10α-甲氧基-1，6-二甲基麥角林-8β-甲醇，HPLC峰面積歸一化法測(cè)定其含量為99.7％，可作為本品體內(nèi)代謝研究的對(duì)照品。 目前國(guó)內(nèi)外藥典尚未收載尼麥角林的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，本文對(duì)尼麥角林原料藥和注射用尼麥角林的質(zhì)量控制方法進(jìn)行

2、了深入研究。采用非水滴定法測(cè)定尼麥角林對(duì)照品的含量；采用RP-HPLC法測(cè)定尼麥角林原料和注射劑的含量及進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢查，選擇HypersilC18柱(250×4.6mm，10μm)，甲醇-30mmol·L-1NaH2PO4水溶液-三乙胺(60：40：0.8，磷酸調(diào)節(jié)pH3.5±0.1)為流動(dòng)相，在287nm處測(cè)定。在此色譜條件下，尼麥角林在濃度為2.5～80μg·ml-1范圍內(nèi)，峰面積與其濃度線性關(guān)系良好(r=0.9999)，檢測(cè)限為

3、2ng(S/N=3)；原料藥中間精密度試驗(yàn)RSD為0.58％(n=5)，重復(fù)性試驗(yàn)RSD為0.74％(n=6)，加樣回收率為99.4％；注射劑中間精密度試驗(yàn)尺SD為0.85％(n=5)，重復(fù)性試驗(yàn)RSD為0.78％(n=6)，加樣回收率為99.3％。有關(guān)物質(zhì)檢查原料藥限量為2.0％，注射劑限量為3.0％。依據(jù)所建標(biāo)準(zhǔn)對(duì)40℃加速六個(gè)月以及常溫下放置18個(gè)月的中試樣品進(jìn)行了穩(wěn)定性考察。本研究工作為尼麥角林原料及其注射劑的質(zhì)量控制提供了準(zhǔn)確

4、可行的分析方法。 本文進(jìn)行了注射用尼麥角林在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究。建立了甲醇沉淀蛋白的血漿樣品預(yù)處理方法，采用HypersilC18柱(250×4.6mm，10μm)，0.03mol·L-1NaH2PO4水溶液-甲醇-三乙胺(69：31：0.8，磷酸調(diào)節(jié)pH3.5±0.1)為流動(dòng)相的HPLC法，在228m處測(cè)定大鼠血漿中尼麥角林代謝物1-MMDL的濃度。在此色譜條件下，1-MMDL在0.2～4.0mg·L-1范圍內(nèi)，濃度與峰

5、面積線性關(guān)系良好(r=0.9920)，檢測(cè)限為5.0ng(S/N＞3)。1-MMDL的空白加樣回收率、樣品加樣回收率均＞95％，日內(nèi)和日間精密度的RSD均＜5.0％，本法可用于注射用尼麥角林在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究。 應(yīng)用所建方法進(jìn)行了8只大鼠單劑量注射尼麥角林后的藥代動(dòng)力學(xué)研究。試驗(yàn)表明，尼麥角林進(jìn)入大鼠體內(nèi)后迅速被血漿酯酶水解為1-MMDL等代謝產(chǎn)物，由于原型藥物尼麥角林在血漿中無(wú)法檢測(cè)，故本文以其主要代謝物之一1-MMD

6、L為對(duì)象進(jìn)行研究。其中1-MMDL在大鼠體內(nèi)過(guò)程符合二室模型，其主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)為：藥時(shí)曲線下面積(AUC)為4.5932±2.4243mg·L-1·h；峰濃度(Cmax)為1.3615±0.4161mg·L-1；達(dá)峰時(shí)間(Tmax)為0.7813±0.0884h；吸收半衰期(t1/2,ka)為0.1791±0.0875h；分布半衰期(t1/2,α)為1.1819±0.5435h；消除半衰期(t1/2.β)為8.2076±5.6882