假肥大型肌營(yíng)養(yǎng)不良癥的臨床特征、肌肉MRI、病理、基因突變及干細(xì)胞治療的系列研究.pdf

1、Duchenne型肌營(yíng)養(yǎng)不良癥(Duchenne muscular dystrophy，DMD)是最常見的X-連鎖隱性遺傳性疾病，定位于XP2.11，發(fā)病率為1/3500活產(chǎn)男嬰。該病的主要臨床特征是四肢近端進(jìn)行性肌萎縮無(wú)力、小腿腓腸肌假性肥大，一般3-5歲起病，病情進(jìn)行性進(jìn)展，9～12歲喪失行走能力，多于20歲左右死于呼吸衰竭和/或心力衰竭。Becker型肌營(yíng)養(yǎng)不良癥(BMD)是一種良性的X-連鎖遺傳的DMD變異型，發(fā)病率約為1/20

2、000。BMD臨床表現(xiàn)與DMD相似但病情較輕，16歲以上仍保持行走能力。DMD和BMD是由同一基因突變所致但臨床表型差別較大，DMD被認(rèn)為是致死性的而BMD則相對(duì)良性，生存期較長(zhǎng)，半數(shù)BMD患者生活質(zhì)量較高。 DMD是臨床描述最清楚的一種肌營(yíng)養(yǎng)不良癥，現(xiàn)今對(duì)DMD的治療仍無(wú)有效辦法，研究證實(shí)早期診斷、早期給予糖皮質(zhì)激素類藥物治療、矯形康復(fù)治療及心肺功能治療均可使DMD患者的存活年齡明顯延長(zhǎng)，生存質(zhì)量明顯提高；并且及早確診可為產(chǎn)前

3、診斷提供信息避免患病家庭中新的DMD患兒的出生；加強(qiáng)防治盡可能延緩疾病的進(jìn)展也可為將來(lái)有效的治療奠定基礎(chǔ)，因此了解我國(guó)目前DMD患者的診斷情況和臨床特點(diǎn)非常有必要；宏觀的MRI和微觀的肌肉病理均可反應(yīng)DMD的病變情況，因此二者的檢查對(duì)了解疾病的進(jìn)展規(guī)律及動(dòng)態(tài)判斷病情的變化都起著非常重要的作用，并且MRI可客觀、無(wú)創(chuàng)的評(píng)價(jià)治療效果；基因分析是DMD的確診手段，通過基因分析可了解中國(guó)人群的DMD基因突變特點(diǎn)，判斷疾病的病情及推測(cè)疾病的預(yù)后，

4、探索疾病的致病機(jī)制；產(chǎn)前診斷和種植前遺傳學(xué)診斷是預(yù)防DMD患兒出生的最有效手段，尤其是種植前遺傳學(xué)診斷可避免因流產(chǎn)帶給孕婦的心理和身體創(chuàng)傷；目前DMD尚無(wú)有效的治療方法，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的干細(xì)胞移植治療有效但是它在體內(nèi)的動(dòng)態(tài)分布及對(duì)疾病的改善情況尚不清楚，干細(xì)胞移植的臨床研究更是空白。本研究總結(jié)了本課題組近年來(lái)在此領(lǐng)域的工作： ①闡述了321例DMD/BMD患者的診斷年齡及臨床特征，通過心電圖和超聲心動(dòng)圖檢測(cè)了患者的心臟情況，應(yīng)用反應(yīng)心

5、臟整天功能的指標(biāo)Tei指數(shù)明確了患者早期的心功能受損情況； ②證實(shí)了MRI和肌肉病理在疾病進(jìn)展過程中的表現(xiàn)不同，并且對(duì)患者肌肉MRI改變與肌肉病理改變進(jìn)行了對(duì)比研究，表明MRI檢查是一種可靠、客觀的診斷DMD的方法； ③分析了388例中國(guó)人群DMD/BMD患者的基因突變特點(diǎn)，探討了基因型與表現(xiàn)型的關(guān)系，對(duì)了解疾病的發(fā)病機(jī)制有重要意義；對(duì)于DMD的預(yù)防方面，進(jìn)行了攜帶者的檢查，對(duì)高危家庭婦女進(jìn)行了產(chǎn)前診斷和種植前遺傳學(xué)診斷

6、，有效避免了DMD患兒的出生，種植前診斷更是避免因流產(chǎn)帶給孕婦的心理和身體創(chuàng)傷的最有效手段； ④本研究應(yīng)用3H-TdR標(biāo)記大鼠MSCs后移植入放療的mdx鼠體內(nèi)，動(dòng)態(tài)觀察MSCs在體內(nèi)的分布規(guī)律及向骨骼肌細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，并且檢測(cè)這種轉(zhuǎn)化對(duì)mdx鼠的治療作用； ⑤通過2例臨床干細(xì)胞移植治療DMD患者的研究探索干細(xì)胞移植在臨床治療的安全性和有效性。 結(jié)論： 1.DMD患兒病情進(jìn)展的規(guī)律是，61％的患兒從18個(gè)月開

7、始習(xí)步；走路易跌倒；5.1歲上樓梯困難；腳尖走路(跟腱攣縮)和鴨步，腰椎前凸；平地行走能力衰退，平均10.7歲不能行走；出現(xiàn)膝關(guān)節(jié)、髖關(guān)節(jié)、肘關(guān)節(jié)攣縮；不能自己從輪椅上過渡至床上；不能自行在床上翻身；呼吸功能或心臟功能衰竭。 2.DMD患者心臟病變發(fā)生率高而且早，應(yīng)用評(píng)價(jià)心臟整體功能的心肌做功指數(shù)Tei可早期反應(yīng)DMD患者心功能受損情況。 3.DMD患者近端骨骼肌受累的規(guī)律是，最早是臀肌受累，然后依次是大收肌、股二頭肌、

8、股直肌、股外側(cè)肌、半腱肌、半膜肌，股薄肌和縫匠肌相對(duì)不受累，但隨病程進(jìn)展亦出現(xiàn)不同程度累及。 4.建立了肌肉MRI表現(xiàn)與肌肉病理表現(xiàn)的對(duì)比研究方法，無(wú)創(chuàng)性的肌肉MRI可一定程度上取代肌肉活檢以觀察病情的動(dòng)態(tài)變化。 5.中國(guó)人DMD基因缺失突變同樣遵循2個(gè)缺失熱區(qū)的規(guī)律，重復(fù)突變主要集中于DMD基因外顯子2-43之間；約92.31％的突變符合閱讀框原則，重復(fù)突變較缺失突變不遵循閱讀框的趨勢(shì)更加明顯。基因型相同而表現(xiàn)型不同提

9、示環(huán)境因素在疾病的發(fā)生過程中起了一定的作用。 6.檢出DMD攜帶者并進(jìn)行產(chǎn)前診斷可避免DMD患兒的出生；胚胎種植前遺傳學(xué)診斷是避免DMD患兒出生的有效手段，可避免因流產(chǎn)帶給孕婦的心理和身體創(chuàng)傷。 7.骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞靜脈移植入DMD模型mdx鼠體內(nèi)后，其分布規(guī)律是：先主要分布在血供豐富的器官，然后受微環(huán)境影響定居在病損的肌肉，并分化為骨骼肌細(xì)胞且表達(dá)抗肌萎縮蛋白，一定程度改善mdx鼠的病理狀況。 8.長(zhǎng)期隨訪干細(xì)