雷米普利對阿霉素腎病大鼠腎臟TLR4，NF-ΚB，IL-8表達(dá)的影響.pdf

1、背景與目的
　　 近年來人們越來越關(guān)注腎素-血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensin system,RAS)在腎臟疾病中的重要作用。血管緊張素Ⅱ(angiotensin,AngⅡ)是RAS中最活躍最重要的成分,它與受體結(jié)合后,可產(chǎn)生血流動力學(xué)效應(yīng)和非血流動力學(xué)效應(yīng)。AngⅡ的非血流動力學(xué)效應(yīng)在腎臟病領(lǐng)域主要表現(xiàn)為增加腎小球?yàn)V過膜的通透性,促進(jìn)腎臟各種固有細(xì)胞增殖,促進(jìn)炎癥細(xì)胞浸潤與黏附,促進(jìn)腎小球細(xì)胞外基質(zhì)增生,導(dǎo)致腎

2、小球硬化和腎間質(zhì)纖維化。Toll樣受體(Toll-likereceptors,TLRs)屬于模式識別受體(pattern recognition receptors,PRRs),識別病原相關(guān)分子模式(pathogen associated molecular patterns,PAMPs)。TLRs在機(jī)體免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)過程中發(fā)揮重要作用。研究發(fā)現(xiàn):AngⅡ可能誘導(dǎo)Toll樣受體4(Toll-like receptor4,TLR4)基

3、因表達(dá)上調(diào),從而可能加重腎臟損傷。TLR4與配體結(jié)合后,激活其信號傳導(dǎo)級聯(lián)反應(yīng),活化核因子-κB(nucleus factor-κB,NF-κB),進(jìn)而促進(jìn)機(jī)體釋放IL-8等炎癥因子,使腎小球基底膜通透性增高,加重蛋白尿。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)可通過改善腎小球?yàn)V過膜通透性,減少細(xì)胞外基質(zhì)聚集等非血流動力學(xué)效應(yīng)保護(hù)腎臟。
　　 本研究旨在通

4、過建立阿霉素腎病模型,觀察TLR4,NF-κB,IL-8在阿霉素腎病大鼠腎小球的表達(dá),進(jìn)一步探討蛋白尿發(fā)生的機(jī)制,并用ACEI類藥物雷米普利干預(yù),通過生化、免疫組織化學(xué)等一系列檢測,進(jìn)一步闡明雷米普利的作用機(jī)制,為其在減少蛋白尿,保護(hù)腎臟方面的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　 材料和方法：
　　 正常6周齡雄性Wistar大鼠40只,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后隨機(jī)分為對照組(A組),模型組(B組),常規(guī)劑量治療組(C組),大劑量治療組

5、(D組),每組各10只。B組,C組,D組大鼠按6mg/kg一次性尾靜脈注射鹽酸阿霉素針(多柔吡星),A組尾靜脈注射等體積生理鹽水,C組和D組于阿霉素注射第二天始給予雷米普利(瑞泰)灌胃。C組給予雷米普利5mg/(kg.d)灌胃,D組給予雷米普利10mg/(kg.d)灌胃。A組和B組分別給予等量生理鹽水灌胃。實(shí)驗(yàn)期間,動物自由飲食飲水。4周末及8周末每組分別處死5只大鼠。測定24h尿蛋白定量及血生化指標(biāo)；取腎臟,行腎組織病理學(xué)檢查,并采用

6、免疫組織化學(xué)方法測定腎小球TLR4,NF-κB,IL-8的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.B組,C組和D組大鼠24h尿蛋白排泄量在4周末及8周末均較A組明顯升高(P<0.05),C組和D組尿蛋白排泄量較B組明顯降低(P<0.05),D組尿蛋白排泄量較C組明顯降低(P<0.05)；B組,C組和D組血清白蛋白水平在4周末及8周末均較A組明顯降低(P<0.05),C組和D組血清白蛋白水平在8周末較B組明顯升高(P<0.05)；

7、B組大鼠血CHO水平較A組明顯升高(P<0.05),C組和D組血CHO水平較B組無差異(P>0.05)；B組大鼠血Cys-C水平較A組明顯升高(P<0.05),D組血Cys-C水平較B組明顯降低(P<0.05)。
　　 2.大鼠腎組織的病理學(xué)改變:A組腎臟組織大致正常,未見系膜細(xì)胞增多,系膜區(qū)變寬等病理改變。第4周末模型組可見腎小球系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)增生,腎間質(zhì)可見炎性細(xì)胞浸潤。第8周末模型組可見腎小球系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)輕度增生

8、,腎間質(zhì)可見明顯炎性細(xì)胞浸澗,伴部分腎小囊擴(kuò)張。治療組病變較模型組減輕。
　　 3.免疫組化結(jié)果:A組中,TLR4,NF-κB,IL-8在腎小球均有弱表達(dá),B組中4周末TLR4,NF-κB,IL-8表達(dá)較A組均有上調(diào),并一直延續(xù)至8周末；C組和D組TLR4,NF-κB,IL-8表達(dá)較B組下凋(P<0.05)；D組TLR4,NF-κB,IL-8表達(dá)較C組下調(diào)(P<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.阿霉素腎病大鼠