慢性鼻-鼻竇炎手術(shù)樣本的細(xì)菌培養(yǎng)研究.pdf

1、慢性鼻-鼻竇炎(Chronic Rhinosinusitis，CRS)是耳鼻咽喉科臨床上的常見(jiàn)疾病，公認(rèn)的致病因素為感染(細(xì)菌、真菌、病毒)、竇口鼻道復(fù)合體解剖結(jié)構(gòu)異常、變態(tài)反應(yīng)、黏膜黏液纖毛系統(tǒng)功能異常等。其中，細(xì)菌感染作為急性鼻-鼻竇炎的致病因素已無(wú)爭(zhēng)議，但在CRS的致病作用尚未完全闡明。然而，臨床上卻是在每個(gè)CRS病例的手術(shù)前后都常規(guī)應(yīng)用廣譜抗生素治療。 隨著抗生素的廣泛應(yīng)用，細(xì)菌的耐藥現(xiàn)象得到了越來(lái)越多的關(guān)注。已經(jīng)明確，

2、需氧菌中的葡萄球菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等均可被誘導(dǎo)產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶，大腸埃希菌和肺炎克雷伯氏菌可被誘導(dǎo)產(chǎn)生超廣譜β-內(nèi)酰胺酶，這類細(xì)菌對(duì)多數(shù)β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥。此外，耐甲氧西林葡萄球菌(Methicillin-Resistant Staphylococci，MRS)則具有對(duì)所有β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥的特征。用細(xì)菌培養(yǎng)的方法研究CRS病例的細(xì)菌感染率、菌群分布和耐藥情況，對(duì)于規(guī)范應(yīng)用抗生素，以及CRS的合理治療都有重要意義。

3、 本研究對(duì)象為CRS病例，樣本為內(nèi)鏡下鼻竇手術(shù)中獲得的上頜竇口附近前組篩竇黏膜，采用需氧菌及厭氧菌培養(yǎng)，并進(jìn)行抗生素敏感試驗(yàn)，檢測(cè)抗生素耐藥菌株。研究目的是調(diào)查本地區(qū)CRS病例的細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率、菌群分布和耐藥菌株的生長(zhǎng)情況，以便進(jìn)一步規(guī)范CRS的治療。 材料與方法:1、研究對(duì)象 為2005年10月至2008年1月在金華市中心醫(yī)院耳鼻咽喉科進(jìn)行內(nèi)鏡下鼻竇手術(shù)的67例CRS病例。根據(jù)?？跇?biāo)準(zhǔn)，Ⅱ型Ⅱ期51例、Ⅱ型Ⅲ期7例、Ⅲ型9

4、例。所有病例術(shù)前均經(jīng)過(guò)抗生素準(zhǔn)備。2、標(biāo)本收集 在內(nèi)鏡下鼻竇手術(shù)過(guò)程中，無(wú)菌操作下取部分上頜竇口附近前篩竇黏膜樣本，以連續(xù)平板劃線法完成樣本的厭氧血瓊脂平板接種，將平板放入?yún)捬醢l(fā)生袋(含指示劑)，封閉袋口。無(wú)菌操作下再取部分黏膜樣本，置于無(wú)菌容器中，30分鐘內(nèi)與厭氧發(fā)生袋一同送細(xì)菌室。 3、細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定置于無(wú)菌容器中的樣本以分區(qū)平板劃線法分別接種于5％綿羊血瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板、巧克力瓊脂平板，35℃、5％CO2孵箱孵育

5、18～24小時(shí)觀察菌落生長(zhǎng)狀況；厭氧發(fā)生袋也置于35℃、5％CO2孵箱內(nèi)，孵育48小時(shí)觀察結(jié)果。 對(duì)分離的可疑病原菌行革蘭染色，觸酶或氧化酶試驗(yàn)，根據(jù)初步的革蘭染色鏡下觀察結(jié)果選擇相應(yīng)的VITEK-AMS鑒定卡，所有細(xì)菌均鑒定到種。 Nitrocéfine紙片檢測(cè)產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶菌，雙紙片法(頭孢他啶及頭孢他啶/克拉維酸組合，或頭孢噻肟及頭孢噻肟/克拉維酸組合)檢測(cè)產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶菌，頭孢西丁紙片檢測(cè)耐甲氧西林葡萄球菌

6、。 4、抗生素敏感試驗(yàn)采用標(biāo)準(zhǔn)瓊脂擴(kuò)散法(K-B法)，并依據(jù)美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)研究所推薦使用的抗生素結(jié)合本地區(qū)臨床用藥習(xí)慣進(jìn)行藥敏紙片選擇及抗生素敏感試驗(yàn)，按美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)研究所2005年抗微生物藥物敏感性試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)判斷敏感、中介、耐藥。嗜血桿菌的抗生素敏感試驗(yàn)按嗜血桿菌藥敏試劑條操作規(guī)程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)及藥敏判讀。 結(jié)果:1、細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定134份樣本中共分離出40株細(xì)菌，其中需氧菌38株(95％)，厭氧菌2株(5％)。

7、培養(yǎng)分離出1株細(xì)菌的病例有38例，檢出的細(xì)菌為需氧菌36株，厭氧菌2株；培養(yǎng)分離出2株細(xì)菌的病例有1例，檢出的細(xì)菌均為需氧菌。培養(yǎng)檢出細(xì)菌的病例共39例，陽(yáng)性率為58.2％(39/67)。 培養(yǎng)得到的革蘭氏陽(yáng)性需氧菌有21株，主要是凝固酶陰性葡萄球菌，有20株，占95.2％，見(jiàn)表1。 培養(yǎng)得到的革蘭氏陰性需氧菌有17株，主要是腸桿菌，有15株，占88.2％，見(jiàn)表2。 培養(yǎng)得到的厭氧菌分別是1株消化鏈球菌，1株具核

8、梭桿菌，見(jiàn)表3。 培養(yǎng)得到的葡萄球菌中，發(fā)現(xiàn)MRS15株，占71.4％，見(jiàn)表4。 培養(yǎng)得到的葡萄球菌中，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶菌(Beta-Lactamase-producing Bacteria，β-LPB)20株，占95.2％，見(jiàn)表5。 2、抗生素敏感試驗(yàn)對(duì)葡萄球菌體外抗菌效果較好的抗生素有萬(wàn)古霉素、利福平等，見(jiàn)表6。 對(duì)腸桿菌體外抗菌效果較好的抗生素有亞胺培南、頭孢吡肟、頭孢他啶、慶大霉素，見(jiàn)表7.