初治與復發(fā)卵巢上皮性癌組織中BCRP、P-gp、LRP和Akt的表達及其臨床意義.pdf

1、目的：本課題對上皮性卵巢癌(卵巢癌)同一位患者初治與復發(fā)時手術切除組織標本中BCRP、P-gp、LRP和Akt的表達狀況進行免疫組化分析，結(jié)合臨床資料，旨在從腫瘤干細胞標志物和耐藥蛋白的表達角度揭示卵巢癌多藥耐藥現(xiàn)象，為卵巢癌可預見性選擇有效化療藥物和判斷化療效果提供有價值的標志物。進一步加深對卵巢癌復發(fā)耐藥機制的理解，并為卵巢癌的治療提供新思路。 方法： 1.研究對象本研究收集2002年01月至2008年01月河北醫(yī)科

2、大學第四醫(yī)院婦科收治的復發(fā)卵巢癌患者30例，并符合以下條件：①初次手術前未經(jīng)化療；②組織學確診；③初次手術后均給予以鉑類為基礎的聯(lián)合化療(PC方案：順鉑75mg/m2，環(huán)磷酰胺600mg/m2)6療程以上；④復發(fā)后均給予第二次手術，取得同一位患者兩次手術的癌組織標本。根據(jù)WHO細胞分化標準，初次術后，中分化19例，低分化11例；第二次手術后，中分化11例，低分化19例。 2.實驗方法標本取得后，用組織切片機作4um厚連續(xù)切片。玻

3、片經(jīng)左旋多聚賴氨酸(PLL)處理后制組織切片。標本進行BCRP、P-gp、LRP、Akt免疫組化染色。隨機選擇高倍鏡(×40)10個視野，計數(shù)腫瘤細胞總數(shù)和陽性細胞個數(shù)，得出陽性細胞百分率。 3.統(tǒng)計分析：應用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件，兩組陽性率差別的假設檢驗用X2檢驗和Fisher確切概率計算法，Spearman等級相關分析二者的相關性，顯著水平為雙側(cè)α=0.05。 結(jié)果： 1.BCRP、P-gp、LRP和A

4、kt在復發(fā)卵巢癌組織中的陽性表達率均明顯高于初治癌組織皆有顯著性差異；BCRP在復發(fā)癌組織中的過表達率高于初治癌組織，有顯著性差異。而復發(fā)卵巢癌組織中P-gp、LRP、和Akt的過表達率與初治癌組織相比，差別無顯著性。 2.在30例復發(fā)卵巢癌患者中，初治癌組織中低分化者11例，復發(fā)癌組織中低分化者19例，8名患者由初治時的中分化轉(zhuǎn)為復發(fā)時的低分化，轉(zhuǎn)化率為42.1％(8/19)，復發(fā)癌組織中低分化者所占比例較初治癌組織低分化者所

5、占比例增高，有顯著性差異。 3.在復發(fā)卵巢癌組織中BCRP低分化癌與中分化癌陽性表達率、過表達率相比，低分化癌陽性表達率、過表達率高于中分化癌，皆有顯著性差異。而在復發(fā)卵巢癌組織中P-gp、LRP、和Akt低分化癌與中分化癌陽性表達率、過表達率相比，差別均無顯著性。 4.在復發(fā)卵巢癌組織中BCRP、P-gp、LRP和Akt陰性表達組患者化療有效率均高于陽性表達組。 5.在復發(fā)卵巢癌組織中BCRP與P-gp、LRP

6、、Akt的表達均呈正相關關系。 結(jié)論： 1.BCRP在獲得性耐藥方面可能發(fā)揮更大作用，BCRP的過度表達與卵巢癌復發(fā)明顯相關。P-gp、LRP、和Akt在介導化療藥物誘導的獲得性耐藥方面可能發(fā)揮作用。 2.對臨床資料進行分析提示卵巢癌復發(fā)與組織分化降低有顯著相關性。 3.BCRP的表達與患者病理分級有關，而P-gp、LRP、和Akt與患者病理分級無關，表明BCRP與維持細胞處于未分化或低分化原始狀態(tài)有關；

7、腫瘤干細胞高表達BCRP，推測BCRP也可用以控制干細胞的分化，因此推測，BCRP可以將化療藥物、分化相關因子泵出細胞，導致腫瘤化療后少數(shù)處于未分化或低分化狀態(tài)的腫瘤干細胞仍然存活，從而導致腫瘤耐藥、復發(fā)。 4.BCRP、P-gp、LRP和Akt耐藥基因的表達增強與腫瘤細胞對化療反應差相關，能較好地判斷化療療效，而且這四個指標的表達對耐藥的預測值也較高。 5.在復發(fā)卵巢癌組織中BCRP與P-gp、LRP、Akt的表達均呈