IL-6在2型糖尿病大鼠中的作用.pdf

1、目的：近年來(lái)，2型糖尿病的發(fā)病率逐年升高，但其機(jī)制尚未完全明確，很多研究提示了慢性低水平炎癥在2型糖尿病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起了重要作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立2型糖尿病大鼠模型并觀察白細(xì)胞介素-6（IL-6）抗原及IL-6抗體對(duì)2型糖尿病大鼠的影響，分析二者的干預(yù)效果，探討IL-6等炎癥因子對(duì)糖尿病發(fā)病機(jī)制的重要作用。 方法：健康雄性SD大鼠36只，隨機(jī)分為四組：N組（正常對(duì)照組，10只），A組（糖尿病IL-6抗原組，10只），B組（糖尿

2、病IL-6抗體組，8只），C（糖尿病對(duì)照組，8只）。均普通飼料喂養(yǎng)。A、B、C三組連續(xù)7周按1ml/100mg體重-d給予脂肪乳灌胃，N組按同樣劑量給予水灌胃對(duì)照。第7周末測(cè)定血清胰島素，計(jì)算并比較各組胰島素水平，顯示脂肪乳灌胃組（即A、B、C組）胰島素高于N組。遂于次日清晨稱取動(dòng)物體重，按30mg/kg體重尾靜脈注射STZ。3天后，血糖測(cè)定結(jié)果大于16.7mmol/l為2型糖尿病造模成功。造模后繼續(xù)普通飼料喂養(yǎng)和脂肪乳灌胃（0.5ml

3、/100mg體重/d）。成模后第2天，A組給予IL-6抗原稀釋液（10ug/ml）腹腔注射0.6ml/只/d，連續(xù)干預(yù)5天；B組給予0.01M PBS液腹腔注射0.6ml/只/d，連續(xù)干預(yù)4天，第5天IL-6抗體液（1mg/ml）腹腔注射0.6ml/只；C、N組均給予0.01M PBS液腹腔注射0.6ml/只/d，連續(xù)干預(yù)5天。四組大鼠均于成模后第7天處死。取血測(cè)血清胰島素、血脂、IL-6、游離脂肪酸；取大鼠肝臟測(cè)定胰島素受體，RT-P

4、CR檢測(cè)肝臟IL-6mRNA表達(dá)量。所得數(shù)據(jù)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件分析。 結(jié)果：高糖高脂飲食7周后，與對(duì)照組相比，糖尿病A、B、C組血清胰島素升高明顯（20.10±10.02，20.45±7.94，19.46±5.94vs11.57±5.85）（P<0.05），ISI明顯降低（-6.09±0.68，-6.01±0.52，-6.02±0.45 vs-4.13±0.59）（P<0.05），HOMA-IR明顯升高（23.86±14

5、.75，20.35±10.21，19.78±7.52 vs3.15±1.61）（P<0.05）；STZ誘導(dǎo)后A、B、C組2型糖尿病大鼠全部成模。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，糖尿病A、B、C組體重較對(duì)照組降低明顯（309.90±20.75，303.75±39.26，319.75±20.53 vs410.60±22.37）（P<0.05）；A、B、C組大鼠的血清TG、TC、LDL、FFA水平均明顯高于N組（P<0.05）；與N組比較，A、B、C組大鼠肝細(xì)胞

6、膜胰島素受體水平升高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（7.09±4.93，7.03±4.97，6.84±4.65 vs4.39±3.09）（P<0.05）；與B、C、N組比較，A組大鼠血清IL-6水平明顯升高（1058.89±223.97 vs404.34±60.33，411.72±126.17，407.43±88.52）（P<0.05）；A組大鼠肝臟組織IL-6mRNA表達(dá)水平較B組明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（0.50±0.35vs0.18±0.08）（

7、P<0.05）。相應(yīng)的IL-6抗原或抗體干預(yù)前后，ABCN四組各組內(nèi)比較顯示：A、B、C三組血糖下降明顯（P<0.05），但前后血糖變化無(wú)相關(guān)性（P>0.05）；B、C組各組內(nèi)分別進(jìn)行干預(yù)前后比較，胰島素水平及HOMA-IR下降均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（B組20.35±10.21vs12.04±3.50）（C組19.78±7.52vs8.88±1.65）（P<0.05）、ISI升高明顯（B組-6.01±0.52vs-5.57±0.27）（C組-6

8、.02±0.45vs-5.28±0.22）（P<0.05），但僅B組干預(yù)前后胰島素及HOMA-IR變化有相關(guān)性（P<0.05）、ISI變化均無(wú)相關(guān)性（P>0.05）。 結(jié)論：（1）脂肪乳灌胃（高糖高脂飲食）7周加小劑量一次尾靜脈注射STZ可以成功誘導(dǎo)SD大鼠的2型糖尿病模型，方法可靠，可全部成模；（2）2型糖尿病大鼠肝細(xì)胞膜上的胰島素受體數(shù)目增多，可能與胰島素敏感性及作用下降有關(guān)；（3）外源性給予IL-6抗原可以使2型糖尿病大鼠

9、血清及肝臟IL-6水平增高，通過(guò)炎性細(xì)胞因子表達(dá)增加影響糖尿病，表現(xiàn)為胰島素水平無(wú)降低，胰島素抵抗程度無(wú)減輕，胰島素的敏感性無(wú)明顯增加；同時(shí)血糖水平并未因IL-6抗原干預(yù)升高；（4）外源性給予IL-6抗體能夠降低2型糖尿病大鼠的胰島素水平，減輕其胰島素抵抗，其機(jī)制可能與慢性低水平炎癥的緩解有關(guān)；但血糖水平并未因IL-6抗體干預(yù)降低。因此，IL-6究竟是一種致病因素、保護(hù)因素或者僅僅是一個(gè)炎癥標(biāo)記物，需要在今后的研究中進(jìn)一步明確，以便更好