甘氨雙唑鈉提高復(fù)發(fā)食管癌放射治療療效的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：
　　 食管癌為我國(guó)高發(fā)腫瘤，年發(fā)病率及死亡率分別位居第三位和第四位。多數(shù)患者就診時(shí)已經(jīng)不能進(jìn)行手術(shù)治療，根治性放化療是其主要治療手段。放療后腫瘤局部復(fù)發(fā)率高達(dá)30-40％，是治療失敗的主要原因之一。此時(shí)，再程放療結(jié)合全身化療往往是其唯一選擇，但長(zhǎng)期生存率僅為10-20％。目前認(rèn)為再次治療失敗的可能原因有:(1)局部正常組織在首呈根治性放療中已經(jīng)接受了相當(dāng)高的照射劑量，致使再程放療不能給以復(fù)發(fā)腫瘤根治性的照射劑量;(2)由

2、于前次照射對(duì)瘤床微環(huán)境的影響（主要是對(duì)微血管的破壞），可能導(dǎo)致復(fù)發(fā)腫瘤的乏氧比例增高，從而對(duì)放療抵抗。目前公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)復(fù)發(fā)腫瘤模型為模擬臨床實(shí)際情況，在種植移植瘤前給予移植部位一定劑量的放射線照射。多種人源性及鼠源性復(fù)發(fā)腫瘤的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究已經(jīng)證實(shí)，這種復(fù)發(fā)腫瘤模型中腫瘤細(xì)胞的乏氧程度明顯高于正常生長(zhǎng)的腫瘤，該現(xiàn)象被稱為“腫瘤瘤床效應(yīng)”，因此利用乏氧增敏劑結(jié)合放療有望成為控制復(fù)發(fā)腫瘤的有效手段。甘氨雙唑鈉是我國(guó)自主開發(fā)的臨床上最為常用的放射

3、增敏劑。研究表明甘氨雙唑鈉對(duì)實(shí)體瘤的乏氧細(xì)胞有明顯的放射增敏作用。腫瘤內(nèi)乏氧細(xì)胞比例越高，乏氧增敏劑的療效越好。
　　 目的：
　　 本研究擬通過對(duì)腫瘤生長(zhǎng)延遲時(shí)間的監(jiān)測(cè)評(píng)估甘氨雙唑鈉加放療對(duì)復(fù)發(fā)腫瘤的控制情況;應(yīng)用針對(duì)乏氧及血管示蹤劑在組織細(xì)胞學(xué)水平檢測(cè)復(fù)發(fā)腫瘤模型的血供及乏氧情況，以期:(1)確定建立食管癌放療復(fù)發(fā)動(dòng)物模型的可行性及技術(shù)參數(shù);(2)分析食管癌放療復(fù)發(fā)腫瘤的乏氧微環(huán)境特征;(3)探討甘氨雙唑鈉提高照射對(duì)

4、食管癌復(fù)發(fā)腫瘤的控制作用的可能。
　　 方法:
　　 60只裸鼠隨機(jī)分入對(duì)照組和預(yù)處理組，每組30只，預(yù)處理組種植腫瘤前24小時(shí)，給予腫瘤種植部位（右下肢）X線照射10Gy。在裸鼠右側(cè)大腿外側(cè)處接種食管鱗癌細(xì)胞(ECA109)建立裸鼠移植瘤模型。成瘤并達(dá)到入組標(biāo)準(zhǔn)后，每組隨機(jī)分為:空白治療組、單純照射組和乏氧增敏+照射組三個(gè)亞組，每組10只?？瞻字委熃M不做任何治療;單純照射組給予30Gy/3次照射，每次照射間隔1周，照射

5、前腹腔注射生理鹽水;乏氧增敏+照射組給予單純照射組相同照射劑量，每次照射前30min腹腔注射甘氨雙唑鈉1mmol/kg。每個(gè)亞組取8只觀測(cè)腫瘤生長(zhǎng)，2只免疫組化微觀水平評(píng)價(jià)腫瘤乏氧狀態(tài)。兩組腫瘤體積差異比較采用配對(duì)T檢驗(yàn)，運(yùn)用單因素方差分析腫瘤生長(zhǎng)延遲。圖像處理應(yīng)用Adobe Photoshop7.0軟件。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 腫瘤種植部位預(yù)照射10Gy后，腫瘤生長(zhǎng)速度明顯慢于未處理組，兩

6、組生長(zhǎng)到照射時(shí)間（平均徑10mm）分別為17天和33天。對(duì)于實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組，照射均可以抑制腫瘤的生長(zhǎng)。未經(jīng)預(yù)照射（對(duì)照）腫瘤組使用甘氨雙唑鈉加照射組與單純照射組的腫瘤抑制作用相近，而在預(yù)照射組（復(fù)發(fā)腫瘤模型），甘氨雙唑鈉加照射組的腫瘤生長(zhǎng)明顯慢于單純照射組。配對(duì)t檢驗(yàn)顯示，各時(shí)間點(diǎn)數(shù)值兩兩比較，p均小于0.01。預(yù)照射組再次照射合并使用CMNa處理后，腫瘤體積抑制率增加的最明顯，末次處理后28-30天可使抑制率平均提高40.81％;而對(duì)

7、照射組末次照射合并使用CMNa處理后35天抑制率增加達(dá)到最大值，但僅僅為8.05％。病理結(jié)果分析顯示預(yù)照射組血管生成減少，腫瘤區(qū)域內(nèi)的乏氧及壞死區(qū)域明顯增加。
　　 結(jié)論:
　　 本課題表明在建立裸鼠移植瘤模型時(shí)給予種植部位單次10Gy的預(yù)照射可產(chǎn)生明顯的瘤床效應(yīng)。種植部位預(yù)照射后腫瘤生長(zhǎng)緩慢，血管生成減少，乏氧程度增加，對(duì)再程放療不敏感。對(duì)于該復(fù)發(fā)腫瘤模型，放療增敏劑甘氨雙唑鈉可提高放射治療的療效。本課題為尋求早期預(yù)測(cè)