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1、菊芋(Helianthus tuberosus L.)原產(chǎn)于北美,為菊科(Compositae)向日葵屬多年生草本植物。菊芋葉片中含有大量的化學(xué)成分,主要是酚類和倍半萜內(nèi)酯類化合物,綠原酸類化合物是該植物葉片中的重要生理活性成分,具有清熱解毒、保肝利膽、抗菌消炎、抗誘變等多種藥用功能,有著良好的發(fā)展前景。
近年來(lái)對(duì)綠原酸的研究主要集中于金銀花和杜仲葉等植物中綠原酸的提取純化、含量測(cè)定、結(jié)構(gòu)鑒定及藥理作用等方面,而對(duì)菊科向日
2、葵屬植物菊芋葉片中綠原酸類化合物的研究少有報(bào)道,本文探索了采用HPLC法檢測(cè)菊芋葉片中綠原酸的條件,優(yōu)化了提取方法并采用大孔吸附樹脂對(duì)綠原酸物質(zhì)進(jìn)行分離,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
1、建立了菊芋葉片中綠原酸的HPLC檢測(cè)方法
高效液相色譜法的檢測(cè)條件是:色譜柱:Agilent C18(4.6x150 mm,5μm);檢測(cè)波長(zhǎng):327 nm;流動(dòng)相:1%磷酸溶液:乙腈=87:13;流速:1 ml/min;柱溫:30℃;進(jìn)
3、樣量:5μl。該方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確,可用于菊芋葉片中綠原酸含量的測(cè)定。
2、研究了菊芋葉片中綠原酸的提取工藝條件,比較了提取方法、提取試劑、提取溫度、提取時(shí)間和固液比等因素對(duì)綠原酸含量的影響。在提取溫度、時(shí)間、固液比的單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,采用正交試驗(yàn)法優(yōu)化了菊芋葉片中綠原酸的提取工藝。試驗(yàn)結(jié)果表明最佳提取工藝為:回流提取法,提取試劑為70%甲醇,提取溫度80℃,提取時(shí)間2.5 h,固液比1:25,認(rèn)為該研究結(jié)果可為利用菊芋
4、葉片工業(yè)化生產(chǎn)綠原酸提供科學(xué)依據(jù)。
3、研究了大孔吸附樹脂分離綠原酸的條件,分別考察了樹脂的靜態(tài)吸附率和解析率,比較研究了上樣液濃度、流速、pH值對(duì)吸附率的影響,以及洗脫液濃度和流速對(duì)解析率的影響,繪制了洗脫曲線。試驗(yàn)結(jié)果表明,NKA-2型大孔吸附樹脂有較好的吸附率和解析率,在上樣液濃度為0.11 mg/ml、流速為2.0 ml/min、pH值為2.0時(shí),NKA-2型樹脂有最佳的吸附效果,當(dāng)洗脫液為40%乙醇、流速為0.5
5、 ml/min時(shí),NKA-2型樹脂有最佳的解析效果,洗脫曲線表明用50 ml的洗脫液就可以基本將綠原酸洗脫下來(lái),且洗脫峰較為集中。
4、分別測(cè)定了大豐地區(qū)3個(gè)菊芋品種各自的3個(gè)生長(zhǎng)期及大慶地區(qū)2個(gè)菊芋品種葉片中的綠原酸含量。試驗(yàn)結(jié)果表明,大豐地區(qū)南芋10號(hào)在不同生長(zhǎng)期均有較高的綠原酸含量,而采自大慶地區(qū)的菊芋葉片樣品中綠原酸含量明顯高于大豐地區(qū)。相比之下,大慶地區(qū)南芋1號(hào)有最高的綠原酸含量,為葉片干重的2.139%,表明菊
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