CGRP和IB4(+)C纖維在神經(jīng)病理性疼痛陽—陰性癥狀中的作用.pdf

1、目的：
　　神經(jīng)病理性疼痛的外在表現(xiàn)既包含以痛覺過敏為特點的陽性癥狀也可能伴隨以痛覺減退為特點的陰性癥狀，而同時伴隨不同種類的陽性和陰性癥狀的神經(jīng)病理性疼痛最為常見。探索可能導致不同癥狀的神經(jīng)病理改變，是完善神經(jīng)病理性疼痛發(fā)病機制并進行針對性治療的必要條件。本研究采用應用不同的壓力一過性擠壓大鼠坐骨神經(jīng)，構建復合神經(jīng)病理性疼痛陽性和陰性癥狀的動物模型，并與經(jīng)典的坐骨神經(jīng)慢性縮窄傷(CCI)模型作對比。系統(tǒng)評估這兩個模型大鼠熱痛覺、

2、冷痛覺、靜態(tài)和動態(tài)機械痛覺以及疼痛相關行為等神經(jīng)病理性疼痛表現(xiàn)，并分析外周傳入神經(jīng)纖維，背根神經(jīng)節(jié)及其脊髓背角投射這一神經(jīng)傳導通路上IB4和CGRP的表達變化，探索CGRP和IB4免疫陽性神經(jīng)傳導通路對大鼠神經(jīng)病理性疼痛陽性或陰性癥狀的不同調節(jié)作用。
　　方法：
　　1.體重200～250g成年雄性SD大鼠24只，隨機分為4組:Sham(n=6)、100g組(n=6)、400g組(n=6)和CCI組(n=6)。Sham組僅暴

3、露左側坐骨神經(jīng)而不結扎，100g組和400g組分別以100g和400g的壓力壓迫大鼠坐骨神經(jīng)3*10s，CCI組建立左側CCI模型，術前1天及術后3、7、10、14、21、28天分別測定左足內外側及右足內外側機械痛閾和熱痛閾和并對左右足的冷痛覺，動態(tài)觸覺及自噬行為和疼痛行為等進行評價，術后3、10、21、28天分批灌注處死，取左側坐骨神經(jīng)、左側腰5背根節(jié)及腰膨大處脊髓，多聚甲醛固定過夜。
　　2.取以上4組大鼠3、10、21、28

4、天腰5背根節(jié)，OCT包埋，取200微米、250微米、300微米處切面，行雙標免疫熒光染色，計算背根節(jié)中陽性細胞個數(shù)，比較各時間點不伺組之間的陽性細胞數(shù)差異。取以上4組大鼠3、10、21、28天腰膨大處脊髓（約L4、L5節(jié)段），OCT包埋后行雙標免疫熒光染色，計算同側及對側板層Ⅱ內IB4纖維面積及CGRP纖維面積。取以上4組大鼠10天坐骨神經(jīng)，行波蒂安銀染，比較4組神經(jīng)纖維密度。
　　結果：
　　1.與D0天相比，100g組和

5、CCI組先后出現(xiàn)了熱痛和機械痛的痛覺過敏(P＜0.05)，冷痛覺、動態(tài)觸覺和疼痛相關行為的評分也較D0天增高。與100g組和CCI組相反，400g組出現(xiàn)了明顯的痛覺減退，表現(xiàn)為熱痛閾和機械痛閾升高(P＜0.05)，盡管冷痛覺、動態(tài)觸覺和疼痛相關行為的評分也一定程度的升高，但重觸覺的變化卻沒有統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　2.在背根節(jié)中，與Sham組相比，100g組和CCI組的IB4和CGRP陽性細胞數(shù)出現(xiàn)了短暫的減少，而400

6、g的IB4和CGRP陽性細胞數(shù)出現(xiàn)了持久的、難以恢復的減少。在脊髓當中，與對側相比，100g組、400g和CCI組腰膨大板層Ⅱ中的IB4纖維均出現(xiàn)了減少，但只有400g組的CGRP纖維出現(xiàn)了明顯的減少(P＜0.05)，而100g組和CCI組的CGRP纖維面積沒有出現(xiàn)變化。在坐骨神經(jīng)中，波蒂安銀染顯示400g組第10天的神經(jīng)纖維明顯較另外兩組和sham組稀疏。
　　結論：
　　1.100g壓力一過性擠壓大鼠坐骨神經(jīng)產(chǎn)生與CCI