川芎嗪對IPF大鼠脆性位點基因WWOX、FHIT影響的研究.pdf

1、目的：
　　本研究采用目前較為通用的博萊霉素氣管內注射制作的大鼠肺纖維化模型，分離培養(yǎng)肺纖維化大鼠肺泡Ⅱ型上皮細胞，借助于細胞學、分子生物學、免疫組織化學等實驗方法，研究該細胞內染色體脆性位點基因WWOX、FHIT表達的改變，為今后開展肺間質纖維化的基因治療提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　健康清潔級SD雄性大鼠18只隨機分為假手術組、模型組及川芎嗪預防用藥組。各組動物適應性喂養(yǎng)一周后分別進行手術。假手術組暴露氣管后即縫

2、合切口，模型組及川芎嗪組則經(jīng)氣管緩慢注入博萊霉素（5mg/kg）后同樣縫合切口。川芎嗪組于術后第2天開始灌胃給藥，給藥劑量為20mg·kg-1·d-1。實驗期間，大鼠自由飲水和進食，并分別于給藥后7d、14d和28d，每組隨機取2只大鼠處死，提取肺泡Ⅱ型上皮細胞進行原代培養(yǎng)。對體外培養(yǎng)72h后的肺泡Ⅱ型上皮細胞利用免疫組織化學方法分析WWOX和FHIT蛋白的表達,RT-PCR技術檢測WWOX、FHIT基因的改變情況。
　　結果：<

3、br>　　1、假手術組大鼠肺泡Ⅱ型上皮細胞內WWOX和FHIT蛋白表達均呈現(xiàn)強陽性。與假手術組比較，造模7d后模型組大鼠肺泡Ⅱ型上皮細胞內WWOX和FHIT蛋白表達無顯著變化(P＞0.05)。而用藥14、28d后，WWOX和FHIT蛋白表達則明顯下降(P＜0.05)。川芎嗪組與模型組相比有顯著上調(P＜0.05)。
　　2、用藥7d后，模型組、川芎嗪組與假手術組WWOX和FHIT基因mRNA表達無明顯差異(P＞0.05)，模型組與

4、川芎嗪組相比亦無明顯差異(P＞0.05)；用藥14d后，模型組WWOX和FHIT基因mRNA表達比假手術組明顯降低(P＜0.05)，川芎嗪組比模型組則顯著升高(P＜0.05)；用藥28d后的結果與用藥14d后的結果相似。
　　結論：
　　1、在肺間質纖維化過程中存在著染色體脆性位點基因WWOX和FHIT的改變。
　　2、川芎嗪可以在一定程度上抑制染色體脆性位點基因WWOX和FHIT的改變，從而可以起到一定的防治肺間質纖