p38MAPK信號(hào)通路在肌源性IL--6抑制胰島素抵抗發(fā)生的作用研究.pdf

1、本論文研究p38絲裂原活化蛋白激酶(p38 Mitogen-activated protein kinases，p38MAPK)信號(hào)通路在肌源性IL-6抑制胰島素抵抗發(fā)生的作用。探討肌肉、肝、脂肪和血液在運(yùn)動(dòng)和高脂膳食以及注射載體shRNA干預(yù)下，研究p38MAPK與IL-6在各組織表達(dá)量的變化以及它們?cè)诟纳苹蛞种茖?shí)驗(yàn)大鼠胰島素抵抗的作用。
　　目的:
　　研究高脂膳食大鼠在有氧耐力訓(xùn)練和shRNA的干預(yù)下，肌源性IL-6與

2、胰島素抵抗的關(guān)系，探討p38MAPK在肌源性IL-6抑制胰島素抵抗的作用，為了解運(yùn)動(dòng)改善Ⅱ糖尿病的機(jī)制以及為治療代謝類(lèi)綜合癥尋找新的治療藥物和靶點(diǎn)提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　選取清潔級(jí)雄性SD大鼠72只，約3周齡，體重110±10g，隨機(jī)分成9組:安靜正常飼料組(A，n=8);安靜高脂飼料組(B，n=8);運(yùn)動(dòng)高脂飼料組(C，n=8);運(yùn)動(dòng)高脂飼料shRNA組(D，n=8);運(yùn)動(dòng)高脂飼料空白載體組(E，n=8);安靜高脂

3、飼料shRNA組(F，n=8);安靜高脂飼料空白載體組(G，n=8);安靜正常飼料shRNA組(H，n=8);安靜正常飼料空白載體組(I，n=8)。運(yùn)動(dòng)組大鼠進(jìn)行為期8周的跑臺(tái)有氧訓(xùn)練，每周訓(xùn)練6天，每天一次，起始跑速為16m/min,時(shí)間為50min;每完成一周有氧耐力訓(xùn)練，跑速逐級(jí)增加1m/min，時(shí)間延長(zhǎng)5min;至第8周時(shí)，跑速為23m/min，時(shí)間為85min。同時(shí)采用尾部靜脈注射shRNA載體或空白載體，共注射4次，第一次注

4、射在正式開(kāi)始有氧訓(xùn)練前一天尾部靜脈注射，后三次每運(yùn)動(dòng)2周后休息日注射;經(jīng)8周飼養(yǎng)，所有大鼠采用麻醉法處死。取大鼠血液以及肌肉組織（腓腸肌、比目魚(yú)肌和股四頭?。⒅荆ǜ怪┖透芜M(jìn)行測(cè)試。采用GOD-PAP法測(cè)血糖，酶聯(lián)免疫測(cè)血清胰島素濃度及IL-6蛋白含量，Western blot（蛋白質(zhì)印跡）測(cè)各組織p38MAPK的蛋白表達(dá)量，使用Real time-PCR測(cè)各組織IL-6mRNA表達(dá)水平。比較不同組別和組織IL-6和p38MAPK的

5、變化，分析與胰島素抵抗的關(guān)系及其原因;比較胰島素抵抗大鼠和運(yùn)動(dòng)大鼠組織IL-6和p38MAPK蛋白表達(dá)的變化并分析原因。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果并結(jié)合先前的研究成果，總結(jié)討論p38MAPK在肌源性IL-6抑制胰島素抵抗發(fā)生的作用。
　　結(jié)論:
　　(1)本研究高脂飲食方法建立的胰島素抵抗模型是有效的。
　　(2) RNA干擾IL-6基因表達(dá)有效且各組織和血液IL-6表達(dá)不同。
　　(3)大鼠不同組織IL-6和p38MA

6、PK的表達(dá)有組織特異性且受運(yùn)動(dòng)的影響。運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致高脂飲食大鼠肝、脂肪和肌肉組織IL-6均上升，其中脂肪組織上升最大;運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致高脂飲食大鼠p38MAPK在肝組織的表達(dá)量顯著下降，在脂肪和肌肉組織的表達(dá)量下降不明顯。
　　(4)有氧耐力訓(xùn)練可以抑制高脂飲食大鼠胰島素抵抗發(fā)生，降低機(jī)體胰島素抵抗程度。
　　(5)運(yùn)動(dòng)引起肌源性IL-6表達(dá)增加可以改善或抑制胰島素抵抗發(fā)生。
　　(6) IL-6可能通過(guò)p38MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路