芝麻素對(duì)長(zhǎng)春瑞濱誘導(dǎo)人肺腺癌A-549細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：觀察芝麻素（Sesamin）協(xié)同長(zhǎng)春瑞濱（Vinorelbine）作用于人肺腺癌A-549細(xì)胞株的影響，為以后的臨床應(yīng)用奠定了一些理論及實(shí)驗(yàn)依據(jù),特別是為以后非小細(xì)胞肺癌的化療提供了一些新的思路。
　　方法：實(shí)驗(yàn)細(xì)胞選擇人肺腺癌A-549細(xì)胞株，并在體外進(jìn)行培養(yǎng)。采用MTT比色法測(cè)定芝麻素、長(zhǎng)春瑞濱、芝麻素協(xié)同長(zhǎng)春瑞濱對(duì)人肺腺癌A-549細(xì)胞株的抗增殖作用；應(yīng)用倒置顯微鏡、HE染色、Hoechst_33258染色熒光顯微鏡等

2、方法觀察芝麻素、長(zhǎng)春瑞濱、芝麻素協(xié)同長(zhǎng)春瑞濱對(duì)人肺腺癌A-549細(xì)胞株的細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)變化；通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)芝麻素、長(zhǎng)春瑞濱、芝麻素協(xié)同長(zhǎng)春瑞濱應(yīng)用于人肺腺癌A-549細(xì)胞株后細(xì)胞凋亡情況以及細(xì)胞周期的影響；應(yīng)用酶標(biāo)儀檢測(cè)對(duì)照組及各實(shí)驗(yàn)組（芝麻素組、長(zhǎng)春瑞濱組、芝麻素協(xié)同長(zhǎng)春瑞濱組）的caspase-3的活性變化。
　　結(jié)果：①M(fèi)TT比色法檢測(cè)結(jié)果表明:芝麻素在濃度為10μg/ml～100μg/ml的范圍內(nèi)作用于人肺腺癌A-54

3、9細(xì)胞株48小時(shí)后，發(fā)現(xiàn)低濃度的芝麻素具有一定的抑制人肺腺癌A-549細(xì)胞株增殖的作用，長(zhǎng)春瑞濱在濃度為5μg/ml～35μg/ml的范圍內(nèi)作用于人肺腺癌A-549細(xì)胞株48小時(shí)后，發(fā)現(xiàn)它具有抑制人肺腺癌A-549細(xì)胞株增殖的作用，且隨著藥物的濃度增加使細(xì)胞的抑制率也隨之增高，芝麻素協(xié)同長(zhǎng)春瑞濱聯(lián)合使用對(duì)人肺腺癌A-549細(xì)胞株的生長(zhǎng)抑制率高于兩個(gè)單藥使用（P<0.01）；②倒置顯微鏡、HE染色法、Hoechst33258熒光染色觀察細(xì)

4、胞形態(tài)學(xué)，發(fā)現(xiàn)用芝麻素組（S40μg/ml）、長(zhǎng)春瑞濱組（N20μg/ml)和聯(lián)合用藥組（S40μg/ml+N20μg/ml)作用于人肺腺癌A-549細(xì)胞株48小時(shí)后均比對(duì)照組貼壁細(xì)胞數(shù)量明顯減少，細(xì)胞間連接疏松，貼壁能力減弱，部分人肺腺癌A-549細(xì)胞貼壁不牢固、體積變小、變圓或變不規(guī)則形，核染色質(zhì)凝集，細(xì)胞膜起泡形成凋亡小體，失去原有腫瘤細(xì)胞多角形或梭形形態(tài)，并且可看出聯(lián)合組比單藥組更加明顯；③流式細(xì)胞儀檢測(cè)人肺腺癌A-549細(xì)胞株

5、早期凋亡率結(jié)果顯示，藥物作用48小時(shí)后，芝麻素組（S40μg/ml）、長(zhǎng)春瑞濱組(N20μg/ml)和聯(lián)合用藥組（S40μg/ml+ N20μg/ml)均比對(duì)照組早期凋亡率高，并且聯(lián)合用藥組的早期凋亡率明顯的高于單藥使用的芝麻素組及長(zhǎng)春瑞濱組；④芝麻素濃度在IC50（40μg/ml）處理人肺腺癌A-549細(xì)胞株48h后，G0/G1期細(xì)胞百分比下降，S期細(xì)胞百分比上升，阻滯周期于S期。長(zhǎng)春瑞濱濃度在IC50（20μg/ml）處理人肺腺癌A

6、-549細(xì)胞株48h后，G0/G1期細(xì)胞百分比下降，G2/M期細(xì)胞百分比上升，阻滯周期于G2/M期。芝麻素與長(zhǎng)春瑞濱聯(lián)合應(yīng)用于人肺腺癌A-549細(xì)胞株48h后，G0/G1期細(xì)胞百分比下降，S期和G2/M期細(xì)胞百分比均上升，但S期更為明顯，故主要阻滯周期于S期。⑤芝麻素與長(zhǎng)春瑞濱聯(lián)合作用人肺腺癌A-549細(xì)胞株后caspase-3的活性程度較單一用藥明顯提高。
　　結(jié)論：
　　1.低濃度的芝麻素具有一定的抑制人肺腺癌A-549

7、細(xì)胞株增殖的作用；
　　2.芝麻素協(xié)同長(zhǎng)春瑞濱聯(lián)合作用于人肺腺癌 A-549細(xì)胞株具有顯著的抑制作用和協(xié)同抗惡性腫瘤細(xì)胞作用；
　　3.從形態(tài)學(xué)角度分析，芝麻素及長(zhǎng)春瑞濱均對(duì)人肺腺癌A-549細(xì)胞株有誘導(dǎo)作用，且聯(lián)合用藥更為顯著；
　　4.芝麻素與長(zhǎng)春瑞濱對(duì)人肺腺癌A-549細(xì)胞的抑制具有協(xié)同作用，與單藥使用長(zhǎng)春瑞濱相比，聯(lián)合使用可減少長(zhǎng)春瑞濱的用藥劑量；
　　5.芝麻素聯(lián)合長(zhǎng)春瑞濱主要抑制細(xì)胞周期S期，發(fā)揮抗腫