金銀花綠原酸的提取及其對熱應激肉?？寡趸δ艿挠绊懷芯?pdf

1、金銀花是一種傳統(tǒng)中藥材，有清熱解毒的作用。現(xiàn)代研究表明，金銀花的花和葉中含有的綠原酸、黃酮等成分，具有清除體內(nèi)超氧離子自由基，保護組織免受氧化應激損傷的作用。為了觀測金銀花綠原酸提取物對肉牛的抗熱應激效果，本研究開展了以下三部分試驗:(1)金銀花的花和葉中綠原酸超聲提取工藝及參數(shù)優(yōu)化。(2)金銀花綠原酸提取物對肉牛的抗熱應激作用。(3)金銀花綠原酸提取物對熱應激肉牛抗氧化酶表達的影響。
　　試驗一:采取超聲波技術(shù)，通過單因素試驗對

2、提取參數(shù)（包括超聲功率、超聲時間、溶劑濃度、提取溫度、料液比）進行初篩，選擇各因素中提取效果較好的2個水平;然后采用正交試驗設計(L827)對提取參數(shù)進一步優(yōu)化。結(jié)果表明:金銀花的花和葉中綠原酸的最佳提取條件均為料液比1∶35，乙醇濃度70％，超聲時間45min，超聲功率300 w，超聲溫度70℃;在此參數(shù)條件下，金銀花的花中綠原酸得率為55.25 mg/g，葉中綠原酸得率為28.80 mg/g。
　　試驗二:選擇體重360±20

3、kg的健康錦江黃牛20頭，分為0.0％、0.2％、0.4％和0.6％金銀花綠原酸提取物添加組，每組5頭牛。試驗牛均飼喂于夏季高溫條件下，試驗包括預試期10d，正試期60 d。正試期間，觀測每日早中晚牛舍溫度和相對濕度，并在第20 d、40 d、60 d測定供試牛的體溫、呼吸頻率和血清生化指標。結(jié)果顯示:1)夏季高溫環(huán)境下，牛舍平均溫濕指數(shù)高于79，肉牛處于熱應激狀態(tài)。2）體溫:在第40 d，0.2％和0.6％金銀花提取物添加組試驗牛的體

4、溫顯著低于對照組(P＜0.05)，其他各組各階段均無顯著差異（P＞0.05）。3）呼吸頻率:與對照組相比，0.2％添加組試驗牛的呼吸頻率在41～60 d顯著降低(P＜0.05);0.6％添加組試驗牛的呼吸頻率在21～40 d和41～60 d均顯著降低(P＜0.05)。4)血液生理生化指標:與對照組相比，金銀花提取物組肉牛的血清甲狀腺素(T3、T4)水平升高，皮質(zhì)醇(COR)含量下降。血清總抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽過氧化物酶(G

5、SH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性均提高，丙二醛（MDA.)含量降低。金銀花提取物組的血糖、總蛋白、白蛋白水平均比對照組顯著升高（P＜0.05）;尿素氮和甘油三酯的含量無顯著差異（P＞0.05）;0.6％添加組血清總膽固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量均顯著低于對照組(P＜0.05），其他各組無差異。這表明金銀花提取物添加后可改善肉?？寡趸阅?，促進蛋白質(zhì)和能量代謝，調(diào)節(jié)脂肪代謝，緩解肉牛熱應激反應;且尤以0.2％和0.6％的

6、添加水平效果較好。
　　試驗三:為了進一步探討金銀花提取物對肉牛的抗熱應激機制，本試驗選擇0.2％金銀花提取物為適宜添加水平，對供試牛放血屠宰，測定肝臟和肌肉中抗氧化指標及抗氧化酶的相對表達量。結(jié)果顯示，金銀花添加組的肝臟中的丙二醛(MDA)含量與對照組相比下降了48.53％(P＜0.05)，肌肉總抗氧化酶(T-AOC)活性顯著高于對照組（P＜0.05），但MDA含量差異不顯著;添加金銀花提取物對試驗牛肝臟和肌肉中的谷胱甘肽過氧化