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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:侵襲-損傷因素與防御-修復(fù)因素的平衡是維持胃十二指腸黏膜完整的必要條件。近20余年,有關(guān)侵襲-損傷因素的研究備受重視并且取得了劃時(shí)代的卓越成就,但近年陸續(xù)有報(bào)道消化性潰瘍、慢性糜爛性胃炎等疾病的發(fā)病率隨增齡而增加,可能與胃黏膜防御-修復(fù)機(jī)制老化有關(guān)。因此本研究試圖通過(guò)觀察不同年齡組“相對(duì)正?!蔽父]黏膜及其功能腺體組織學(xué)、超微結(jié)構(gòu)的隨齡變化規(guī)律,以證實(shí)胃黏膜其防御-修復(fù)功能隨著增齡減退這一現(xiàn)象的存在,并對(duì)其產(chǎn)生的機(jī)制做初步探討。
2、r> 方法:1、選取無(wú)胃十二指腸疾病,并排除影響胃黏膜完整性因素(Hp感染、服用NSAID藥物等),年齡≥20歲的功能性消化不良(functionaldyspepsia,F(xiàn)D)患者作為研究對(duì)象。當(dāng)胃鏡檢查僅為淺表性胃炎時(shí),取胃竇黏膜2塊,1塊做常規(guī)病理,另1塊做電鏡檢查。光鏡下觀察胃竇黏膜組織學(xué)形態(tài),測(cè)量固有膜厚度,黏液腺體實(shí)質(zhì)百分比;電鏡下觀察幽門腺細(xì)胞超微結(jié)構(gòu),計(jì)算黏原顆粒實(shí)質(zhì)百分比。分別比較它們的增齡變化情況。
2、選
3、擇無(wú)Hp感染,2周內(nèi)未服用NSAID藥物,年齡≥20歲的胃手術(shù)患者為研究對(duì)象,原發(fā)病包括胃間質(zhì)瘤、良性幽門梗阻、早期胃惡性腫瘤。在胃手術(shù)標(biāo)本離體10分鐘內(nèi)取胃竇大彎側(cè)肉眼觀正常黏膜組織(距離病灶≥5cm)2塊,大小1*1cm,1塊為胃竇全層組織做常規(guī)病理,另1塊黏膜組織即刻凍存做分子生物學(xué)檢查,包括TBA法測(cè)定胃竇黏膜組織中MDA含量,硝酸還原酶法測(cè)定胃竇黏膜組織中NO含量,Elisa法測(cè)定胃竇黏膜組織中HSP70、PGI2、PGE2、
4、PTEN、Survivin、CGRP、EGF、VEGF、COX-1、COX-2、Caspase-3、Caspase-9、緊密連接蛋白ZO-1等的含量。只有當(dāng)前述標(biāo)本病理組織學(xué)檢查為正?;驕\表性炎癥時(shí)才能納入研究。
結(jié)果:胃鏡下收集符合上述標(biāo)準(zhǔn)的研究對(duì)象共60例,其中中青年組(20-59歲)20例,老年組(≥60歲)40例,老年組又分為三個(gè)亞組,60-69歲組15例,70-79歲組13例,80-89歲組12例。收集符合上述標(biāo)準(zhǔn)的
5、胃手術(shù)研究對(duì)象共36例,中青年組(20-59歲)14例,老年組(≥60歲)22例,其中老年組含60-69歲組8例,70-79歲組6例,80-89歲組8例。
(1)光鏡下定性觀察各年齡組人體胃竇黏膜,隨增齡固有膜厚度及黏液腺腺體形態(tài)未見(jiàn)明顯變化,但在老年組胃竇黏膜固有膜出現(xiàn)間質(zhì)增生明顯,黏液腺腺體排列較中青年組稀疏。定量測(cè)定,各年齡組間比較,固有膜平均厚度均值沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,胃竇黏液腺實(shí)質(zhì)比例均值有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P=0.005;老
6、年組和中青組比較,老年組固有膜厚度低于中青年組,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P=0.578,老年組胃竇黏液腺實(shí)質(zhì)比例明顯低于中青年組, P=0.003。
(2)電鏡下定性觀察各年齡組胃竇幽門腺細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)無(wú)明顯差異,但細(xì)胞中與分泌黏液功能相關(guān)的細(xì)胞器隨增齡有減少趨勢(shì)。定量測(cè)定,各年齡組間比較,黏原顆粒面積分?jǐn)?shù)有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P=0.000;分為老年組和中青年組比較,老年組黏原顆粒面積分?jǐn)?shù)明顯低于中青年組,P=0.000。
(3
7、) TBA法定量測(cè)定人體胃竇黏膜組織中MDA含量,各年齡組間比較,胃竇黏膜組織中MDA含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P=0.402;老年組、高齡老年組胃竇黏膜組織中MDA含量均高于中青年組,但均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
(4)硝酸還原酶法定量測(cè)定胃竇黏膜組織中NO含量,各年齡組間比較,胃竇黏膜組織中NO含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P=0.705;老年組、高齡老年組胃竇黏膜組織中NO含量均高于中青年組,但均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
(5) Elisa法定量測(cè)定
8、胃竇黏膜組織中VEGF、HSP70、PGI2、PGE2、PTEN、Survivin、CGRP、EGF、COX-1、COX-2、Caspase-3、Caspase-9、緊密連接蛋白ZO-1等的含量。各年齡組間比較,胃竇黏膜組織中PGI2(P=0.036)、PGE2(P=0.010)、Survivin(P=0.013)、PTEN(P=0.026)、CGRP(P=0.003)、COX-1(P=0.034)、COX-2(P=0.009)、cas
9、pase-9(P=0.035)等的含量隨增齡明顯降低;而VEGF、HSP70、EGF、ZO-1、caspase-3等的含量隨齡雖有降低趨勢(shì),但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。分為老年組和中青年組比較,老年組胃竇黏膜組織中HSP70(P=0.045)、Survivin(P=0.021)、PTEN(P=0.031)、CGRP(P=0.013)、PGE2(P=0.022)、COX-2(P=0.027)、caspase-9(P=0.008)等的含量明顯低于中青年
10、組;而VEGF、PGI2、ZO-1、EGF、COX-1、caspase-3等的含量雖較中青年組降低,但無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。分為高齡老年組和中青年組比較,高齡老年組胃竇黏膜組織中VEGF(P=0.010)、HSP70(P=0.020)、PGI2(P=0.003)、PGE2(P=0.001)、Survivin(P=0.002)、PTEN(P=0.001)、CGRP(P=0.000)、ZO-1(P=0.005)、EGF(P=0.040)、COX
11、-1(P=0.004)、COX-2(P=0.001)、caspase-9(P=0.013)等的含量均明顯低于中青年組。
結(jié)論:隨增齡人體胃竇黏膜厚度無(wú)退化現(xiàn)象,但分泌黏液的黏液腺體密度明顯降低,與分泌黏液功能直接相關(guān)的細(xì)胞器的密度亦明顯降低,提示老年人胃竇黏膜及其功能腺體在形態(tài)學(xué)上存在退化現(xiàn)象。隨著增齡,胃竇黏膜組織中反映脂質(zhì)過(guò)氧化程度的MDA含量有增加趨勢(shì),反映調(diào)節(jié)黏膜下血流的CGRP、PGE2含量降低,反映抗凋亡的Surv
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