基于不同基底的抗體固定和免疫反應(yīng)的研究.pdf

1、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)是醫(yī)學(xué)、生化等領(lǐng)域應(yīng)用最廣泛的免疫檢測(cè)方法之一,但是三十多年的經(jīng)驗(yàn)表明,這種方法有許多不足之處.該論文主要研究了以下兩個(gè)方面,其一是抗體分子通過(guò)物理吸附法固定在基底之上時(shí),其構(gòu)象發(fā)生改變,大部分的抗體無(wú)法將結(jié)合抗原的有效位點(diǎn)朝向溶液;其二是ELISA用來(lái)吸附抗體的基底是聚苯乙烯微孔板,在微孔板表面存在著許多褶皺起伏,由于聚苯乙烯是強(qiáng)疏水性物質(zhì),水溶液無(wú)法進(jìn)入褶皺之間,因而導(dǎo)致了抗體吸附的有效面積的減少.該

2、文對(duì)這兩種缺陷提出了改進(jìn)方法,其一是通過(guò)在基底表面預(yù)包被一層分子來(lái)固定抗體分子,保持抗體分子的構(gòu)相,其二是通過(guò)采用不同基底來(lái)避免皺褶對(duì)抗體分子吸附的影響.另外我們還采用了一種三維多孔材料來(lái)提高抗體的吸附面積.還制備了一種三維有序多孔材料,由于其特殊的光學(xué)性質(zhì),可以將它應(yīng)用于非標(biāo)記免疫檢測(cè)中.該論文的組織結(jié)構(gòu):第一章關(guān)于背景知識(shí)的介紹,介紹了酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法和用反射干涉光譜儀對(duì)免疫反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)的研究;第二章采用了兩種方法來(lái)固定抗體,一是

3、戊二醛共價(jià)偶聯(lián)法,二是SPA位點(diǎn)導(dǎo)向性固定方法,把兩種新方法與傳統(tǒng)方法進(jìn)行比較;第三章采用兩種方法來(lái)改善傳統(tǒng)基底對(duì)抗體吸附的影響,一是采用超平整聚苯乙烯表面來(lái)代替聚苯乙烯微孔板,二是對(duì)聚苯乙烯微孔板進(jìn)行酒精預(yù)處理來(lái)改善抗體的吸附;第四章主要關(guān)于三維多孔材料的制備和在免疫檢測(cè)方面的應(yīng)用.首先我們制備了三維多孔材料,用SEM分析其表面形貌,然后通過(guò)ELISA和RIfS對(duì)其作為免疫反應(yīng)的基底進(jìn)行分析;第五章是關(guān)于三維有序多孔材料的制備和表征,