基于免疫反應(yīng)的高靈敏檢測(cè)方法的建立.pdf

1、由于量子點(diǎn)及碳納米管(CNTs)獨(dú)特的納米特性及生物兼容性，它們?cè)诿庖叻治鲱I(lǐng)域被廣泛應(yīng)用。本論文分別構(gòu)建了兩種基于免疫反應(yīng)的高靈敏檢測(cè)方法?；诰酆狭孔狱c(diǎn)的超靈敏免疫印跡方法(western blot)用以對(duì)復(fù)雜蛋白樣品進(jìn)行分析檢測(cè)，碳納米管一紙免疫傳感器對(duì)水中的微囊藻毒素進(jìn)行檢測(cè)。
　　 一種免疫方法是：基于量子點(diǎn)的超靈敏蛋白檢測(cè)免疫印跡方法。碲化鎘(CdTe)量子點(diǎn)由于它獨(dú)特的光學(xué)及生物特性，被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)標(biāo)記領(lǐng)域。本

2、論文構(gòu)建了一種基于量子點(diǎn)的超靈敏蛋白檢測(cè)免疫印跡方法。由于親和素功能化的聚合量子點(diǎn)的高親和性及對(duì)檢測(cè)步驟的簡(jiǎn)化，使得量化免疫印跡方法成為現(xiàn)實(shí)。為了制備聚合量子點(diǎn)，首先需要用生物素化的變性牛血清白蛋白(dBSA)包裹量子點(diǎn)，然后通過(guò)生物素與親和素的相互作用，量子點(diǎn)相互偶聯(lián)生成聚合量子點(diǎn)。經(jīng)過(guò)一系列的修飾，碲化鎘量子點(diǎn)的熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)。把聚合量子點(diǎn)作為免疫印跡的標(biāo)志物，其追蹤微量蛋白比傳統(tǒng)染料更靈敏。以蛋白A為例，對(duì)基于聚合量子點(diǎn)的免疫印

3、跡方法進(jìn)行驗(yàn)證，檢測(cè)線性范圍為30pg到1.5ng，檢測(cè)限達(dá)0.84pg。最終在聚偏二氟乙烯膜上的熒光信號(hào)至少可以保持40min。進(jìn)行實(shí)際樣品檢測(cè)時(shí)，回收率達(dá)99.9％到103.0％。
　　 另一種方法是紙—單壁碳納米管復(fù)合物組成的，簡(jiǎn)單且高效的傳感器。碳納米管傳感器的電阻取決于碳納米管網(wǎng)絡(luò)之間的間隙寬度，該方法能很好的滿足常規(guī)毒素的檢測(cè)要求。本論文對(duì)微囊藻毒素進(jìn)行了檢測(cè)并建立了標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性范圍為1.25nmol/L到10nm