肝細(xì)胞癌中apoM表達(dá)水平及其與HNF-1α、LRH-1相關(guān)性研究.pdf

1、目的：檢測(cè)肝細(xì)胞癌(HCC)患者和健康者血漿中載脂蛋白M（apoM）的表達(dá)水平；同時(shí)，檢測(cè)正常肝組織、癌旁組織和肝細(xì)胞癌組織中 apoM、肝受體同系物1（LRH-1）、肝細(xì)胞核因子1α（HNF-1α）的表達(dá)；運(yùn)用RNAi技術(shù)觀察干擾HepG2細(xì)胞內(nèi)HNF-1α后apoM及其相關(guān)脂蛋白apoA-I、FXR、SHP-1、HMGCR、CYP7A1的變化，探討肝細(xì)胞癌中apoM的表達(dá)及apoM表達(dá)水平與LRH-1、HNF-1α表達(dá)水平的相關(guān)性，

2、及影響apoM表達(dá)的分子機(jī)制。
　　方法：運(yùn)用western blot檢測(cè)血漿中apoM水平；采用RT-PCR方法檢測(cè)肝細(xì)胞癌和癌旁組織中apoM、LRH-1、HNF-1αmRNA水平表達(dá)；運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)肝細(xì)胞癌、癌旁組織和正常肝組織中apoM、HNF-1α蛋白水平的表達(dá)，比較肝細(xì)胞癌、癌旁組織和正常肝組織中apoM、LRH-1、HNF-1α的表達(dá)水平，分析LRH-1、HNF-1α與apoM的相關(guān)性；采用RNAi技術(shù)，體

3、外觀察HNF-1α對(duì)apoM及其相關(guān)脂蛋白apoA-I、FXR、SHP-1、HMGCR、CYP7A1表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：肝細(xì)胞癌患者血漿中apoM的蛋白水平明顯高于健康者(P<0.01)；apoM、LRH-1和HNF-1α mRNA在肝細(xì)胞癌組織中的表達(dá)高于癌旁組織(P<0.01)，apoM、HNF-1α蛋白在肝細(xì)胞癌組織中的表達(dá)亦明顯高于癌旁組織(P<0.05),癌旁組織中apoM蛋白表達(dá)高于正常肝組織(P<0.05)，HN

4、F-1α蛋白在癌旁組織與正常肝組織表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；肝細(xì)胞癌和癌旁組織中LRH-1、HNF-1α和apoM mRNA表達(dá)存在顯著相關(guān)性（P<0.01）；采用RNAi技術(shù)成功干擾HNF-1α在HepG2細(xì)胞中的表達(dá)，干擾效率在mRNA和蛋白水平分別為：76.3％、78.4%；RT-PCR結(jié)果顯示，干擾HNF-1α能明顯抑制apoM、FXR、SHP-1 mNRA的表達(dá)，與陰性對(duì)照相比分別下降：47.4%、47.9%、65.2

5、%（p<0.01），增強(qiáng)HMGCR、CYP7A1 mRNA的表達(dá)，與陰性對(duì)照相比分別增高：101.1%、138.5%（p<0.01），而在 mRNA水平對(duì)apoA-I的表達(dá)無明顯影響（p>0.05）。
　　結(jié)論：肝細(xì)胞癌患者血漿中apoM表達(dá)水平明顯高于健康者；apoM在肝細(xì)胞癌組織、癌旁組織和正常肝組織中表達(dá)具有顯著性差異，且 LRH-1、HNF-1α與 apoM表達(dá)存在正相關(guān)性；HNF-1α是apoM表達(dá)和膽固醇合成與轉(zhuǎn)化的重