淫羊藿甙對糖皮質(zhì)激素誘導的骨質(zhì)疏松的作用及機制研究.pdf

1、骨折是骨質(zhì)疏松的嚴重后果，全球大約有2億人口罹患骨質(zhì)疏松癥，骨質(zhì)疏松癥及因骨質(zhì)疏松引起的骨折已成為全球所關注的有關公眾健康的重要問題。Cushing早在1932年最早報道垂體嗜堿細胞腺瘤患者出現(xiàn)激素相關性骨病，Cushing綜合征患者骨形成受抑而骨吸收增加。此后一系列的臨床研究也表明，器官移植術后接受大量免疫抑制劑的患者也易于發(fā)生骨折，大體解剖和組織形態(tài)學分析均證實，這部分患者術后丟失大量骨質(zhì)成分。糖皮質(zhì)激素類藥物包括甲基強的松龍、強的

2、松、地塞米松、氫化可的松等，不但應用于器官移植術后，且在許多疾病的治療，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、腎病綜合癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)等疾病中都具有不可替代的作用，其應用幾乎涉及到臨床各科，糖皮質(zhì)激素性骨質(zhì)疏松的發(fā)病率也僅次于絕經(jīng)后及老年性骨質(zhì)疏松癥而居第3位，使用糖皮質(zhì)激素類藥物長程治療相關的骨質(zhì)疏松已經(jīng)成為臨床醫(yī)師關注的重要問題，應用糖皮質(zhì)激素的同時，如何預防和治療骨質(zhì)疏松都是臨床研究的重點，糖皮質(zhì)激素誘導骨質(zhì)疏松的發(fā)病機制及其防治也越來越受到關注。

3、 我國內(nèi)分泌學和中西醫(yī)結(jié)合先驅(qū)鄺安墊教授在研究皮質(zhì)醇陽虛動物模型時發(fā)現(xiàn)補腎助陽中藥顯著改善皮質(zhì)醇動物的表型，提示中藥可能對糖皮質(zhì)激素誘導的骨質(zhì)疏松具有治療作用。因此在課題的第一部分，我們研究了含淫羊藿復方對地塞米松磷酸鈉誘導的大鼠尿鈣磷排泄，血清堿性磷酸酶和胰島素樣生長因子一l，以及骨微結(jié)構的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)地塞米松磷酸鈉增加了大鼠尿鈣磷排泄，降低了血清胰島素樣生長因子—1水平，骨小梁間距增加，小梁變薄，排列紊亂。同時使用補腎中藥時

4、尿鈣磷排泄減少，血清胰島素樣生長因子—1水平增加，骨小梁間距減小，小梁增寬。提示補腎助陽中藥對糖皮質(zhì)激素誘導的骨質(zhì)疏松具有治療作用。 骨結(jié)構的維持依賴成骨細胞的骨形成作用和破骨細胞的骨吸收作用之間的動態(tài)平衡，研究顯示成骨減少和成骨細胞功能下降是糖皮質(zhì)激素誘導骨質(zhì)疏松形成的主要原因；而近年來大量文獻報告淫羊藿甙刺激成骨細胞增殖分化，但尚未見淫羊藿甙能否改善糖皮質(zhì)激素抑制的成骨細胞增殖分化的相關文獻。本課題的第二部分我們研究了淫羊藿

5、甙和地塞米松對原代培養(yǎng)的成骨細胞堿性磷酸酶活性的影響，以及在此過程中ERK磷酸化的變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)20ug／L淫羊藿甙顯著增加了地塞米松抑制的成骨細胞堿性磷酸酶水平，同時增加ERK的磷酸化水平，而ERK的選擇性抑制劑PD98059顯著降低了淫羊藿甙刺激的堿性磷酸酶水平，提示激活EPK信號通路可能是淫羊藿甙促進成骨細胞分化的機制之一。課題的第三部分研究了淫羊藿甙對小鼠來源的成骨細胞株MC3T3-E1的增殖分化的作用、MAPKs的三個并行通路

6、磷酸化水平的變化，同時觀察MAPKs選擇性(ERK—PD98058、JNK—SP600125、P38-MAPK-SB203580)抑制劑對淫羊藿甙刺激的成骨細胞增殖和分化的影響；進一步研究受體酪氨酸激酶抑制劑SU5416對MAPKs磷酸化的和成骨細胞增殖分化的影響以評估受體酪氨酸激酶在淫羊藿甙刺激的成骨細胞增殖分化和MAPKs信號通路的作用；最后使用實時定量PcR觀察了SU5416和MAPKs抑制劑對淫羊藿甙刺激的一型膠原和骨鈣素表達的