STAT4、Bax與c-myc在非小細胞肺癌組織中的表達及相關(guān)性分析.pdf

1、目的:分析信號轉(zhuǎn)導與轉(zhuǎn)錄激活因子-4(Signal transducer andactivator of transcription-4,STAT4)、Bax蛋白(Bcl-2 associated Xprotein)和c-myc蛋白在非小細胞肺癌(Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC)和正常肺組織中的表達及三者之間的關(guān)系,初步探討STAT4蛋白與NSCLC發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。
　　 方法:利用免疫組織化學

2、SP法檢測40例NSCLC組織和20例正常肺組織中STAT4蛋白、Bax蛋白和c-myc蛋白的表達水平。所有標本均為手術(shù)切除標本,術(shù)前未作任何放療或化療。所納入的40例NSCLC患者年齡在26-72歲之間,將它們分別按年齡、組織分化程度、是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、組織學類型及性別分類。其中,<60歲者25例,≥60歲者15例；高一中分化者28例,低分化者12例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者20例,無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者20例；Ⅰ-Ⅱ期者22例,Ⅲ-Ⅳ期者

3、18例；鱗癌20例,腺癌20例；男性28例,女性12例。各標本組織均經(jīng)10％福爾馬林固定,常規(guī)石蠟包埋,4μm厚連續(xù)切片,切片常規(guī)脫蠟水化,蒸餾水沖洗,磷酸鹽緩沖液(phosphate buffer saline,PBS)浸泡,高溫抗原修復,3％H2O2阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性,并用正常山羊血清封閉交叉反應。滴加一抗(STAT4兔抗人多克隆抗體、鼠抗人Bax多克隆抗體、鼠抗人c-myc多克隆抗體)孵育,PBS沖洗后滴加生物素標記二抗孵育

4、,PBS沖洗后滴加辣根酶標記鏈霉卵白素工作液(S-A／HRP)孵育,PBS沖洗,DAB顯色,蘇木素復染,透明,封片觀察。以胞質(zhì)或胞核內(nèi)出現(xiàn)的明顯的棕黃色或黃褐色顆粒為陽性細胞。在NSCLC組織中,STAT4蛋白、Bax蛋白的陽性表達信號主要位于細胞質(zhì)；c-myc蛋白的陽性表達信號主要位于細胞核,少數(shù)位于細胞質(zhì)。STAT4蛋白按細胞著色深淺和陽性細胞率分為2個水平；Bax蛋白和c-myc蛋白按細胞著色深淺和陽性細胞率分為4個水平。

5、　　 結(jié)果:(1)STAT4蛋白、Bax蛋白和c-myc蛋白在NSCLC組織中的表達水平均高于正常肺組織,其中,STAT4蛋白和c-myc蛋白在兩者中的表達比較差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01)；Bax蛋白在兩者中的表達比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(2)STAT4蛋白在NSCLC組織中的表達與患者組織學類型有關(guān),在腺癌中的表達顯著高于鱗癌(P<0.01),但與患者的年齡、組織分化程度、是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期及性別均無

6、關(guān)(P>0.05)；Bax蛋白在NSCLC組織中的表達與患者是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期有關(guān),在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中的表達明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.01),在Ⅲ-Ⅳ期患者中的表達明顯高于Ⅰ-Ⅱ期者(P<0.01),但與患者的年齡、組織分化程度、組織學類型及性別均無關(guān)(P>0.05)；在NSCLC組織中,c-myc蛋白的表達與患者的年齡、組織分化程度、是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、組織學類型及性別均無關(guān)(P>0.05)。(3)STAT

7、4蛋白和Bax蛋白在NSCLC組織中的表達無相關(guān)性(r=0.091,P=0.728,P>0.05)。(4)STAT4蛋白和c-myc蛋白在NSCLC組織中的表達無相關(guān)性(r=-0.157,P=0.548,P>0.05)；(5)Bax蛋白和c-myc蛋白在NSCLC組織中的表達無相關(guān)性(r=0.443,P=0.075,P>0.05)。
　　 結(jié)論:(1)STAT4蛋白、Bax蛋白和c-myc蛋白在NSCLC組織中的表達均高于正常肺

8、組織,提示這三種蛋白可能均參與了NSCLC的形成過程。(2)STAT4蛋白在NSCLC組織中的表達與患者組織學類型有關(guān),而與患者的年齡、組織分化程度、是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期及性別均無關(guān),提示STAT4蛋白可能只在NSCLC形成的初期起作用；Bax蛋白在NSCLC組織中的表達與患者是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期有關(guān),而與患者的年齡、組織分化程度、組織學類型及性別均無關(guān),提示Bax蛋白可能只是參與了NSCLC的侵襲和轉(zhuǎn)移:c-myc蛋白