白介素-1導致糖皮質(zhì)激素抵抗及其信號轉(zhuǎn)導機制的初步研究.pdf

1、[背景]自身免疫性疾病(AID)發(fā)病機制復雜，自身反應性T細胞、B細胞的激活，是AID過程中一個重要環(huán)節(jié)，表現(xiàn)為細胞因子(Cytokine,CK)分泌紊亂和自身抗體的增加。其中，白介素-1(IL-1)是一種多功能細胞因子，是AID的重要參與者，與多種病理過程有關(guān)，具有促免疫和促炎癥特性。在生理狀態(tài)下，體內(nèi)只有少數(shù)的細胞表達IL-1mRNA，但是在感染、炎性因子刺激下，絕大多數(shù)的細胞均可以表達，主要有單核/巨噬細胞，淋巴細胞等。

2、糖皮質(zhì)激素(GC)是AID的主要治療藥物之一，外源性的GC進入體內(nèi)必須和糖皮質(zhì)激素受體(GR)結(jié)合后才能發(fā)揮抗炎、抑制免疫的作用。在抗炎過程中，GC的一個重要作用就是抑制細胞因子的產(chǎn)生，從而降低炎癥反應中細胞因子的作用。但是，在臨床治療AID過程中，部分患者表現(xiàn)出GC治療不敏感甚至無效。 絲裂素活化蛋白激酶(MAPK)是信號從細胞表面轉(zhuǎn)導到細胞內(nèi)部的重要傳遞者，包括ERK通路，JNK通路，P38通路等。MAPK家族參與了細胞生長

3、、發(fā)育、分裂及細胞間功能的同步等多種生理過程，并在細胞惡性轉(zhuǎn)化等病理過程中起重要作用。細胞外刺激，如：應激，細胞因子(IL-1，TNF-α等)可以激活JNK通路或者P38通路。ERK通路也可能與炎癥反應有關(guān)，但是其激活物為生長因子等。有研究表明IL-1引起的GR的表達減少和P38通路有關(guān)。那么，此過程中是否只有P38通路這一條信號轉(zhuǎn)導通路的作用?ERK通路和JNK通路是否也在此過程中發(fā)揮作用?多條信號轉(zhuǎn)導通路之間是否存在協(xié)同作用?目前的

4、研究還沒有明確的報道。所以，在本研究中，從細胞水平探討IL-1β對GR影響，通過使用3種細胞信號轉(zhuǎn)導通路的特異性阻滯劑預先處理體外分離的單核細胞，分別阻斷：P38通路、JNK通路、ERK通路，再用IL-1β刺激預處理的單核細胞，采用半定量RT-PCR方法檢測其GR表達的改變，以期探討其可能的機制。為闡明糖皮質(zhì)激素抵抗的發(fā)病機制提供部分實驗依據(jù)。 [目的] 1、通過免疫組化的方法定性研究體外分離的單核細胞在IL-1β刺激前

5、后GR表達的變化。 2、通過使用IL-1β刺激體外分離的單核細胞，采用半定量RT-PCR的方法檢測刺激前后GR表達的改變。預先應用特異性細胞信號轉(zhuǎn)導通路阻滯劑分別阻斷體外分離得到的單核細胞P38通路、JNK通路、ERK通路，檢測IL-1β刺激后單核細-Ⅱ-胞GR表達的改變，以探討介導此過程中可能的細胞信號轉(zhuǎn)導通路。 [結(jié)論] 1、IL-1β可以導致體外分離的單核細胞GR表達的減少，推測IL-1β的這種作用可能是引