載脂蛋白A-I（apolipoprotein A-I）及其半胱氨酸突變體結構和功能研究.pdf

1、目的：本研究對野生型apoA-Ⅰ和分別發(fā)生在apoA-Ⅰ多肽鏈7個α螺旋片段上的半胱氨酸突變體二級結構和功能進行比較，以觀察α螺旋極性和非極性界面或其附近的半胱氨酸突變?nèi)绾斡绊慳poA-Ⅰ蛋白的結構和功能；這些特定的半胱氨酸突變體的結構和功能之間是否存在某些必然聯(lián)系。本文希望這些問題的解答能夠?qū)ξ覀兏钊?、更全面的認識天然突變體apoA-ⅠM心血管保護特性的實質(zhì)有所幫助。 結論：1.發(fā)生在不同α螺旋片段上的半胱氨酸突變對apoA

2、-Ⅰ二級結構和構象穩(wěn)定性的影響不同。單體apoA-ⅠM中半胱氨酸突變對apoA-Ⅰ α螺旋含量沒有明顯影響，但是該突變可能導致apoA-ⅠM二級結構穩(wěn)定性降低。 2.單一氨基酸的半胱氨酸突變可以改變apoA-Ⅰ與脂質(zhì)的結合能力，從而對apoA-Ⅰ蛋白促膽固醇外流能力造成部分影響；多肽鏈中央?yún)^(qū)域和C-末端在介導apoA-Ⅰ與脂質(zhì)結合過程中發(fā)揮重要作用。 3.本實驗制備的A-ⅠM(R173C)和其它半胱氨酸突變體單體均不表現(xiàn)

3、明顯抗大豆酯氧化酶催化的磷脂氧化能力。ApoA-ⅠM是否在體內(nèi)具有抗氧化功能，其機制如何尚需進一步體內(nèi)或體外實驗加以驗證。 4.不同α-螺旋片段上的半胱氨酸突變對apoA-Ⅰ促膽固醇外流能力影響不同。單體apoA-ⅠM促膽固醇外流能力低于野生型apoA-Ⅰ。多肽鏈C-末端在apoA-Ⅰ誘導的促膽固醇外流過程中發(fā)揮重要作用。 總之，盡管各半胱氨酸突變體均發(fā)生在apoA-Ⅰ多肽鏈上α螺旋親、疏水性界面附近，但不同螺旋上的突變