變形鏈球菌表面蛋白抗原Ⅰ-Ⅱ唾液結合區(qū)段（SBR）基因表達載體的構建和表達.pdf

1、山東大學碩士學位論文變形鏈球菌表面蛋白抗原ⅠⅡ唾液結合區(qū)段（SBR）基因表達載體的構建和表達姓名：張苗申請學位級別：碩士專業(yè)：口腔內科學指導教師：楊丕山2002.11.10山東大學碩士學位論文／方法：、1分別對原核表達質粒pSBR—CTA2B、載體質粒pcMVT7以限制性內切酶NcoI、XhoI雙酶切，回收SBR片段與載體大片段，以定向克隆的方法，構建閱讀框架正確的原核表達質粒pcMVT7一SBR。2重組質粒pcMVT7一SBR轉化大腸

2、桿菌JMl09(DE3)，IPTG誘導表達，SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測表達產物。3用親和層析的方法純化提純得到羧基端有6個組氨酸的SBR融合蛋白，用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測純化蛋白，用紫外分光光度法測定純化蛋白的濃度。結果：成功構建了閱讀框架正確的原核表達載體pcMVT7一SBR；在大腸桿菌JMl09(DE3)中誘導表達了SBR融合蛋白：通過親和層析的方法純化得到SBR融合蛋白，表達量高達29。73％。結論：通過限制性內切酶酶切初