2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的研究大鼠肝臟CX/GJIC在急性肝功能衰竭(AHF)不同階段的變化規(guī)律;探討嚴(yán)重肝損傷時CX/GJIC的變化對肝損傷修復(fù)的調(diào)控以及三七皂甙在肝損傷修復(fù)中的作用及機(jī)制。@方法 選擇雄性Wistar大鼠260只(SPF級,由江西省實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量檢測中心提供),體重180~200克。所有動物先行適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,隨機(jī)抽取其中的60只作為苯巴比妥組(PB組,n=60),用800PPM濃度的苯巴比妥行預(yù)處理喂養(yǎng)一周。其余200只隨機(jī)分成三組

2、:對照組(n=30),模型組(n=100),三七皂甙組(PNS組,n=70)。PB組動物誘導(dǎo)結(jié)束后,PB、模型和PNS三組動物同瞎開始造模,造模前三天開始四組實(shí)驗(yàn)動物(包括對照組)均予以慶大霉素及乳果糖灌胃,并持續(xù)至造模后三天。采用四氯化碳腹腔注射法建立AHF模型,分別在造模后1、3、7、l0、l4天5個時間點(diǎn)開腹抽取下腔靜脈血標(biāo)本查血生化(ALT),采取肝組織標(biāo)本行HE、免疫組織化學(xué)檢查Cx 3 2蛋白、切開標(biāo)記熒光染料傳輸(IL/D

3、T)查GHC功能和RT-PCR檢查Cx32 mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果 1.造模后動物立即出現(xiàn)精神萎靡,活動及攝食減少,嗜睡,毛色晦暗,腹脹,尿色黃,行動減慢,嚴(yán)重者可伴有全身多臟器出血,抽搐,昏迷甚至死亡。PB組與模型組(P<0.01),PNS與模型組(P<0.05)的組間病死率差別有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明PB和PNS都可以降低AHF模型動物的病死率。2.大體標(biāo)本上可見三組動物在造模后第一天的肝臟組織呈現(xiàn)黃褐色或暗紅色,質(zhì)地

4、松脆,如豆腐渣樣,但PB組與PNS組動物的肝臟外觀要略好于模型組。三天后開始好轉(zhuǎn),但好轉(zhuǎn)后的肝臟與正常肝臟在外形及體積上仍存在差別,主要表現(xiàn)為肝臟增大,邊緣變鈍,顏色變深。后期,模型組及PNS組恢復(fù)至基本正常肝臟顏色、外形及體積,但PB組的肝臟組織明顯增大并呈現(xiàn)一定的瘤型轉(zhuǎn)變傾向,表現(xiàn)為肝臟質(zhì)地偏硬,切開時感覺較韌。HE切片示:對照組肝細(xì)胞正常排列,肝竇存在,細(xì)胞形態(tài)正常,細(xì)胞內(nèi)未見異常物質(zhì)出現(xiàn)或正常物質(zhì)的過多積聚;進(jìn)入模型的各組動物的

5、肝臟組織病理切片顯示肝細(xì)胞的壞死均超過70%以上,損傷以中央靜脈周圍明顯,隨病程發(fā)展,程度不同的波及小葉周邊肝細(xì)胞,符合四氯化碳所致之AHF模型的典型鏡下表現(xiàn)。模型組肝細(xì)胞的損害以損傷后一天時最為明顯,以后逐步恢復(fù),但到后期在HE切片上仍顯示出比較明顯的空泡變性現(xiàn)象,在實(shí)驗(yàn)過程中未能見到完全正常之病理征象,顯示模型組動物的肝臟組織的完全恢復(fù)需要更長時間;PB組肝細(xì)胞腫脹明顯,部分玻璃樣變,損傷在3天時最為明顯,以后逐步恢復(fù),各時間點(diǎn)的病

6、理切片顯示損傷部位主要局限在中央靜脈周圍,小葉周邊的肝細(xì)胞損傷較輕,但到后期出現(xiàn)類似假小葉樣改變;PNS組動物的肝組織表現(xiàn)早期損傷程度較其它各組輕,中后期恢復(fù)快,到第十天時已基本恢復(fù)正常;3.生化結(jié)果顯示,在造模后的第一天,三組動物的ALT指標(biāo)全部升高,符合AHF的轉(zhuǎn)氨酶標(biāo)準(zhǔn),但組間存在差別,以模型組為甚,PB組與PNS組相仿,第三天,PB組ALT進(jìn)一步升高,而模型組和PNS組開始降低,到第七天各組動物的ALT已基本正常。4.對組織進(jìn)行

7、熒光染料傳輸?shù)脑囼?yàn)發(fā)現(xiàn),模型組的染料傳輸能力在造模后與對照組比明顯減低(P<0.01),這種情況在第三天達(dá)到最低程度,此后雖然逐漸恢復(fù),但到第十四天仍與對照組間差別有極顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),證實(shí)在該時間點(diǎn)其GJIC功能仍未能恢復(fù)正常;進(jìn)行了PB誘導(dǎo)的動物其染料傳輸明顯受到抑制,除在第二個時間點(diǎn)與模型組間的差別沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外(P>0.05),其余時間點(diǎn)與其它各組間差別均有極顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);PNS組的染料傳輸

8、在造模后第一天與對照組相比明顯減低(P<0.01),其程度與模型組相仿(P>0.05),但與模型組在第三天時出現(xiàn)縫隙連接通訊能力下降不同的是,PNS組從第三天始由熒光染料傳輸所反映的GJIC功能即開始恢復(fù),與模型組相比差別有極顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),直到第十四天恢復(fù)正常,與對照組間差別沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。5.Cx 32抗體的免疫組化顯示,模型組的Cx 32蛋白主要集中在胞膜上,細(xì)胞間,數(shù)量較PB組明顯增加,且隨著時

9、間的推移,數(shù)量呈進(jìn)行性增加的趨勢;PB組的Cx32主要分布在胞漿內(nèi),而且數(shù)量極少,在造模成功后七天達(dá)到最高點(diǎn)后,又開始下降并維持在一較低水平;PNS組的蛋白分布及數(shù)量與模型組類似。6.通過RT-PCR發(fā)現(xiàn)各組標(biāo)本的Cx32 mRNA的表達(dá),在PB組持續(xù)較低,在何時間點(diǎn)與其它組間差別有極顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);而模型組與PNS組其表達(dá)始終相仿(P>0.05)。 結(jié)論:1.本研究采用的乳果糖+慶大霉素灌胃和四氯化碳+橄欖油

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