廣東某豬場噁唑烷酮類耐藥基因optrA的流行特點.pdf

1、噁唑烷酮類耐藥基因optrA是繼多重耐藥基因cfr之后第2個可介導(dǎo)噁唑烷酮類藥物耐藥的可轉(zhuǎn)移耐藥基因，其與cfr基因不同的耐藥機制和可介導(dǎo)惡唑烷酮類和酰胺醇類藥物耐藥的特性，引起了人們的高度關(guān)注。本研究以廣東某豬場為研究對象，旨在探討optrA基因在不同來源（豬、環(huán)境和工作人員）不同菌種中的流行特點。
　　本文研究對象為2015年采集自廣東某一豬場、場內(nèi)各區(qū)土壤及相關(guān)工作人員的513份樣品（豬鼻拭子252份，豬肛門拭子241份，土

2、壤12份，人8份）。經(jīng)全基因組DNA檢測optrA基因，最終選擇86份樣品采用含氟苯尼考（10μg/mL）選擇性培養(yǎng)基分離菌株，同時PCR檢測及測序比對確定optrA陽性菌株，16S rRNA擴增及序列比對鑒定菌種。結(jié)果顯示，共獲得17株optrA陽性菌株，包括11株腸球菌（2株糞腸球菌、3株屎腸球菌、2株堅韌腸球菌、4株鶉雞腸球菌）和6株奇異變形桿菌。
　　微量肉湯稀釋法測定17株optrA陽性菌株對臨床常用抗菌藥物的敏感性，結(jié)

3、果顯示，17株菌對常用廣譜抗菌藥四環(huán)素和氟苯尼考均耐藥。其中11株optrA陽性腸球菌對紅霉素、阿莫西林、慶大霉素耐藥，但對萬古霉素敏感，對氨芐西林、環(huán)丙沙星、氯霉素、利奈唑胺和青霉素耐藥率超過50.0％。6株奇異變形桿菌對多西環(huán)素、氨芐西林、頭孢唑啉、亞胺培南、鏈霉素、四環(huán)素和甲氧芐啶/磺胺甲噁唑耐藥，對慶大霉素、頭孢噻肟耐藥率達(dá)到60.0%以上，對其余藥物的耐藥率介于30.0%～50.0%之間。
　　采用PCR方法檢測17株o

4、ptrA陽性菌株中其他耐藥基因。結(jié)果未檢測到萬古霉素耐藥基因vanA、vanB、vanC，紅霉素耐藥基因ermC和編碼ATP外排泵基因msrA/msrB。但是，檢測到多重耐藥基因cfr，氟苯尼考耐藥基因fexA、fexB、floR，檢出率分別為35.3%、70.6%、52.9%和29.4%。紅霉素耐藥基因ermA和ermB的檢出率分別為88.2%和82.4%，與其耐藥表型基本保持一致。
　　采用多位點序列分型（MLST）分析糞腸球

5、菌和屎腸球菌的ST型。結(jié)果共獲得4個ST型，分別為ST116，ST480，ST486和ST874。利用脈沖場凝膠電泳（PFGE）進(jìn)行親緣關(guān)系分析，11株腸球菌共獲得10個不同的譜型，6株奇異變形桿菌有5株分型成功，共獲得4個不同的譜型。S1-PFGE和Southern雜交結(jié)果發(fā)現(xiàn)腸球菌中，optrA基因定位于質(zhì)粒上的有9株，位于染色體上的有1株，同時攜帶cfr基因的3株腸球菌中，有2株cfr基因定位于質(zhì)粒上，但與相應(yīng)optrA基因不在同