防風(fēng)及其近緣種的DNA指紋分析及質(zhì)量相關(guān)研究.pdf

1、該實驗應(yīng)用RAPD及ISSR分子標(biāo)記,對來源于黑龍江、河北、陜西、四川、甘肅的五個防風(fēng)及其近緣種共38分樣本進(jìn)行了DNA指紋分析.從100個RAPD引物和32個ISSR引物中分別篩選出21、6個擴(kuò)增結(jié)果穩(wěn)定、擴(kuò)增條帶清晰的引物.其中,8個RAPD引物和3個ISSR引物擴(kuò)增出的帶可以將防風(fēng)及其近緣種區(qū)分開.用篩選出的引物對所有樣本進(jìn)行PCR擴(kuò)增,得到DNA指紋圖,從DNA指紋圖中可見不同品種之間僅有少數(shù)引物得到可以明確區(qū)分它們的不同條帶.

2、同時對電泳條帶進(jìn)行基于遺傳相似度的聚類分析可將5類38份材料分為三類:第一類包括竹節(jié)防風(fēng)、前胡,第二類包括硬苗防風(fēng)、葛縷子,第三類為正品防風(fēng).前兩類之間的遺傳相似度范圍為0.77~0.80,正品防風(fēng)和這二者之間的遺傳相似度范圍為0.72~0.75.不同品種之間的遺傳相似度范圍顯示了正品防風(fēng)與其他防風(fēng)近緣種或混偽品之間的遺傳距離,以及防風(fēng)近緣種之間的遺傳相似性,但也說明正品防風(fēng)與其他防風(fēng)近緣種或混偽品遺傳相似度比較低,具有比較遠(yuǎn)的親緣關(guān)系

3、.在藥物有效成分含量分析方面,該文采用《中華人民共和國藥典》中規(guī)定的高效液相色譜法對所有樣本進(jìn)行了防風(fēng)升麻苷的含量測定.同時,嘗試使用了先進(jìn)的毛細(xì)管電泳法.《中華人民共和國藥典》中規(guī)定防風(fēng)中色原酮類成分的含量不可低于0.308﹪,產(chǎn)地黑龍江富裕的正品防風(fēng)的有效成分升麻苷的含量為0.842﹪~0.864﹪明顯高于其他如硬苗防風(fēng)(河北0.159﹪~0.163﹪)、竹節(jié)防風(fēng)(四川0.350﹪~0.411﹪)、前胡(陜西0.473﹪~0.590