基質(zhì)金屬蛋白酶-2、12在急性脊髓損傷后的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：探討兔急性脊髓損傷(ASCI)后基質(zhì)金屬蛋白酶-2、12(MMP-2、12)在ASCI后的表達(dá)和脊髓損傷的關(guān)系，應(yīng)用不同的MMPs抑制劑改變MMP-2、12的表達(dá)水平觀察是否可以減輕ASCI繼發(fā)性損傷，并進(jìn)一步探討甲強(qiáng)龍干預(yù)ASCI的機(jī)制是否與上述2種酶有關(guān)，證實(shí)MMP-2、12可以被認(rèn)為是用于干預(yù)治療ASCI的靶分子。方法：采用改良Allen打擊法建立家兔ASCI模型，應(yīng)用ELISA法分別檢測(cè)對(duì)照組、ASCI組、多西環(huán)素(DOX

2、)干預(yù)組、MP干預(yù)組的兔血清中MMP-2、12的表達(dá)水平，免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)兔脊髓組織中MMP-2表達(dá)，熒光定量PCR法及凝膠電泳法檢測(cè)兔脊髓組織中MMP-12表達(dá)，對(duì)于脊髓損傷的程度，應(yīng)用改良Tarlov評(píng)分法評(píng)定動(dòng)物雙后肢運(yùn)動(dòng)功能，并對(duì)脊髓組織中MMP-12熒光定量CT值及MMP-2陽性細(xì)胞表達(dá)率與脊髓損傷后Tarlov評(píng)分相關(guān)性進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：免疫組織化學(xué)染色、PCR熒光定量及瓊脂凝膠電泳均證實(shí)兔ASCI后損傷的脊髓組織中MM

3、P-2、12表達(dá)升高，MMP-2免疫組化與MMP-12熒光定量PCR檢測(cè)顯示于損傷后8小時(shí)后兩者已有顯著表達(dá)，24小時(shí)表達(dá)到達(dá)高峰，MMP-2表達(dá)持續(xù)約5天，MMP-12表達(dá)持續(xù)約2天。血清ELISA檢測(cè)同樣顯示MMP-2、12表達(dá)較對(duì)照組明顯升高，并且ASCI后MMP-2、12的表達(dá)與脊髓損傷的程度呈正相關(guān)。同時(shí)應(yīng)用大劑量MP及DOX干預(yù)，能使血清及組織中的MMP-2、12表達(dá)明顯下降，促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)，在ASCI傷后72小時(shí)應(yīng)用DO