熏硫及脫硫處理對(duì)龍眼貯藏生理的影響及轉(zhuǎn)錄組研究.pdf

1、本研究以龍眼為材料，研究脫硫處理對(duì)熏硫龍眼的脫硫效果及貯藏生理的影響，利用轉(zhuǎn)錄組技術(shù)分析龍眼褐變前后及熏硫前后龍眼基因的表達(dá)的變化，并克隆了脂氧合酶cDNA全長(zhǎng)及探討LOX與龍眼果皮褐變的關(guān)系。
　　主要結(jié)果如下：
　　1.經(jīng)熏硫處理的龍眼果實(shí)，果皮和果肉中的亞硫酸鹽含量隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)而下降，果皮中的亞硫酸鹽含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于果肉。不同脫硫材料對(duì)熏硫龍眼脫硫效果差異顯著，其中，效果最好的為京百靈脫硫劑，其次為二氧化氯。

2、　　2. SO2處理顯著改善龍眼果皮外觀色澤，延緩果實(shí)內(nèi)果皮褐變和延長(zhǎng)果實(shí)貯藏期。3％脫硫劑處理后，果實(shí)貯藏效果有所下降，外果皮色度值有所降低，內(nèi)果皮褐變指數(shù)升高，降低了SO2處理的保鮮效果。降低脫硫劑使用濃度和處理時(shí)間可有效降低了果實(shí)亞硫酸鹽含量并維持熏硫效果。
　　3.對(duì)照果實(shí)的SO活性和SO基因表達(dá)量維持于穩(wěn)定水平，熏硫處理后，SO活性和SO基因表達(dá)量有所提升，從而提高了果實(shí)對(duì)亞硫酸鹽的清除能力。再經(jīng)脫硫處理后，SO活性和S

3、O基因表達(dá)量與熏硫處理差異不大。
　　4.轉(zhuǎn)錄組獲得8.98 Gb數(shù)據(jù)，組裝獲得45594條基因，共有33552條（73.6%）基因得到有效注釋。
　　5.運(yùn)用RPKM篩選差異基因及對(duì)比樣本間轉(zhuǎn)錄水平的變化，推測(cè)熏硫處理對(duì)龍眼果實(shí)的保鮮效果可能是通過(guò)抑制褐變過(guò)程中的相關(guān)上調(diào)基因的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的，并且SO2的作用效果是持久的，在進(jìn)一步的貯藏過(guò)程中，進(jìn)一步抑制相關(guān)基因的表達(dá)。GO功能注釋表明，龍眼果皮褐變很有可能是參與細(xì)胞組成的相關(guān)

4、基因在催化活性基因的催化作用下，參與代謝反應(yīng)，參與龍眼果皮的褐變。
　　6.通過(guò) KEGG分析了脂氧合酶代謝途徑中相關(guān)基因變化及硫代謝途徑中相關(guān)基因的變化，豐富了對(duì)龍眼脫硫的認(rèn)識(shí)和龍眼果皮褐變的調(diào)控理論。
　　7.以龍眼總RNA為模板，使用qPCR結(jié)果RACE的方法獲得龍眼脂氧合酶基因cDNA全長(zhǎng)序列，命名為DlLOX。序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)該基因?qū)儆?-LOX，N端信號(hào)肽比對(duì)發(fā)現(xiàn)屬于Ⅰ類，系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析結(jié)果表明龍眼脂氧合酶與荔枝進(jìn)化