白細(xì)胞介素8（IL-8）在早期宮頸鱗癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移中的作用及意義.pdf

1、山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文白細(xì)胞介素8（IL-8）在早期宮頸鱗癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移中的作用及意義姓名：崔麗煥申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：吳素慧20060510山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文A B S T R A C TC a r c i n o m ao ft h e u t e r i n c c e r v i x i S t h es e c o n d c o m m o n e s tf e m a l e c a n c e r

2、w o r l d w i d e ．T h ep r e v a l e n c el i e s i n f i r s tp l a c ei n o u r c o u n t r y ( C h i n a ) a n d b e c o m e o n eo f t h em a i nd i s e a s ew h i c hs e v e r e l yt h r e a t e n h e a l t ho fw o

3、 m e ni n O U rc o u n t r y ．L y m p hn o d e m e t a s t a s i s i s ai n d e p e n d e n tp r o g n o s t i cf a c t o ra n dt h em a i nd e a t h ．c a u s eo fc e r v i c a lC a n c e rp a t i e n t s ．I no r d e rt

4、ou n d e r s t a n dc a r c i n o g e n e s i s ，d e v e l o p m e n t a n dl y m p hn o d em e t a s t a s i s m e c h a n i s mo fc e r v i c a l c a n c e r , o u rp r e v i o u s s t u d yh a d s e l e c t e dt h ed

5、i f f e r e n t i a le x p r e s s i o n g e n e b ye D N A g e n e c h i pa n d f o u n d m a n yg e n e s c o r r e l a t e ds t r o n g l y w i t hl y m p h n o d e m e t a s t a s i s o f e a r l y s q u a m o u sc e

6、 r v i c a l c a n c e l ' ．I nt h e s eg e n e s ，t h ee x p r e s s i o no f I L - 8 i ne a r l y s q u a m o u sc e r v i c a lc a n c e r w i t h l y m p h n o d e m e t a s t a s e dW a sh i g e r 3 ．4t i m e s

7、t h a n w i t h n o m e t a s t a t i cl y m p h n o d e ．W es p e c u l a t e I L - 8 p l a y sa ni m p o r t a n t r o l ei ne e r v i c a lc a n c e r i n v a s i o n a n d m e t a s t a s i s ．P u r p o s e ：T od e t

8、 e r m i n et h e c o r r e l a t i o nb e t w e e nt h e e x p r e s s i o n o fi n t e r l e u k i n 8 ( I L - 8 ) a n dl y m p h n o d e m e t a s t a s e s o f s q u a m o u s c e r v i c a l c a n c e r a n d t o e

9、l u c i d a t e t h e m e c h a n i s m o fI L ·- 8 —- m e d i a t e d i n v a s i o na n dm e t a s t a s e so fe a r l i e r s q u a m o u sc e r v i c a l c a n c e ra n dt o p r o v i d eap o s s i b l en e w c

10、l i n i c a lw a y f o r t h et h e r a p y o f c e r v i c a lC a n c e r ．M e t h o d s ：I L - 8 m R N A e x p r e s s i o nw a se x a m i n e dw i t hr e v e r s et r a n s c r i p t i o np o l y m e r a s ec h a i nr

11、 e a c t i o n ( R T - P C R ) 。T h ee x p r e s s i o no f I L 一8 p r o t e i na n d i n t r a t u m o r m i c r o v e s s e lc o u n t s ( M V C ) i ns q u a m o u sc e r v i c a l c a n c e rw e r ed e c i d e d e dr

12、e s p e c t i v e l yb ya n t i b o d ya g a i n s tI L - 8 a n dC D 一3 4a s s o c i a t e da n t i g e na n dI m m u n o h i s t o c h e m i e a la n a l y s i s ．T h ee x p r e s s i o no fI L - 8p r o t e i ni n b l o

13、 o ds e r t l n lw a sd e t e c t e d E L I S A ．R e c o m b i n a n t h u m a nI L 一8s t i m u l a t ec e r v i c a lc a n c e rc e l l ( S i H aa n dH e L 曲a n d H u m a n u m b i l i c a lv e i n e n d o t h e l i a l

14、c e l l s ( H U V E C ) t od e t e c t I L 一8 - m e d i a t e d c e r v i c a l c a n c e r c e l l s a n dH U V E Cp r o l i f e r a t i o na n d t u m o r - e n d o t h e l i a la d h e s i o n b yM T T a n a l y s i s

15、 ，m i g r a t i o n o f c e r v i c a lC a n c e rc e l l sb y B o y d e nc h a m b e ra n d a n g i o g e n e s i s b y V i t r o A n g i o g e n e s i s A s s a y K i t ．T of u r t h e ri n v e s t i g a t et h ee l l

16、h a n c cf u n c t i o n so f I L 一8i nc e r v i c a lc a n c e r , a nc u k a r y o t i ce x p r e s s i o nv e c t o r p c D N A 3 ．1 ( + ) c a r r y i n g I L 一8 e D N AW a s t r a n s i e n t l y t r a n s f e c t e

17、d i n t o S i H a c e l l s b yL i p e r f e c t a m i n e2 0 0 0 ．T h ee f f e c t so np r o l i f e r a t i o na n dm a l i g n a n to fI L 一8 o v e r - e x p r e s s i o no nS i H a ／p c D N A 3 ．1 ／I L 8 c e l l s w

18、e r e e v a l u a e d b y g r o w t h c h a r a c t e r i s t i c s s u c h a s g r o w t h i na n c h o r a g e —i n d e p e n d e n tg r o w t hi ns o i la g a r ．T oe v a l u a t e dt h er o l e o f I L 一8i nc a n c e

19、 rm e t a s t a s i s ，W C t o o k u s e o f m e t h o d s s u c ha ss c r a p e - ·w o u n d - m i g r a t i o n a s s a y a n d B o y d e n m i g r a t i o na s s a y ．R e s u l t ：T h e c e r v i c a lc a n c e r

20、w i t hl y m p hn o d em e t a s t a s e s e x p r e s sI L 一8a n dM V C a ts i g n i f i c a n t l yh i g h e r l e v e lt h a nn e g t i v em e t a s t a t i cl y m p h n o d e ( P = - 0 ．0 0 ，0 ．0 2 ) ．O t h e r w i s

21、 e ，t h ee x p r e s so f I L 一8c o r r e l a t e ds t r o n g l ya n d p o s i t i v e l y w i t hM V C o f c e r v i c a lc a a c e r ( r = 0 ．2 51 ，P < o ．0 5 ) ．E c t o g e n i c I L 一8C a n s t i m u l a t ec e r

22、 v i c a lc a n c e r c e l l sa n d H U V E C p r o l i f e r a t i o n ，m i g r a t i o n ，e n h a n c et u m o r - e n d o t h e l i a l a d h e s i o na n dp r o m o t ec a p i l l a r yt u b e f o r m a t i o n ．I L