拜阿司匹靈、西比靈聯(lián)合預(yù)處理對高血糖SD大鼠局部腦缺血再灌注損傷的保護作用.pdf

1、本文采用正常血糖條件下和高血糖條件下SD大鼠局部腦缺血再灌注損傷模型，通過觀察神經(jīng)功能缺損評分、腦梗死體積、腦組織病理形態(tài)及內(nèi)皮細胞間黏附因子1(ICAM-1)、內(nèi)皮素1(ET-1)和抑凋亡基因bcl-2的含量變化，來探討(1)高血糖是否加重SD大鼠局部腦缺血再灌注后的損傷及其可能的機制；(2)拜阿司匹靈聯(lián)合西比靈預(yù)處理對正常血糖條件下、高血糖條件下SD大鼠局部腦缺血再灌注損傷是否有保護作用及其可能的機制；(3)在不同血糖條件下，聯(lián)合用

2、藥保護效果是否一致。 方法：72只雄性健康SD大鼠(體重200±20g)，隨機分成4組：正常血糖組(對照組1，n=18)、高血糖組(對照組2，n=18)、正常血糖+拜阿司匹靈+西比靈組(治療組1，n=18)、高血糖+拜阿司匹靈+西比靈組(治療組2，n=18)。各組按缺血90分鐘后再灌注3h(n=6)、6h(n=6)、24h(n=6)分為3個亞組。治療組1及治療組2于手術(shù)前三天開始每天一次分別給予拜阿司匹靈(6mg/kg體重)及西

3、比靈(10mg/kg體重)行灌胃治療。對照組1和治療組1，術(shù)前30分鐘腹腔注射生理鹽水3g/kg體重，栓線前測血糖值小于11.1mmol/l，表示建模成功，為正常血糖組。對照組2和治療組2術(shù)前30分鐘腹腔注射50﹪葡萄糖3g/kg體重，建立高血糖模型，栓線前測血糖值達11.1mmol/l表示建模成功。 利用改良Longa-Zea氏線栓法制備SD大鼠右側(cè)大腦中動脈缺血再灌注模型，于插線90分鐘后拔出拴線，實行再灌注。參考Zea-L

4、onga的5分制評分標(biāo)準(zhǔn)進行神經(jīng)功能缺陷評分。各組斷頭取腦后以2﹪氯化三苯四唑啉(2，3，5-Triphenyltetrazaliumchloride，TTC)染色，判斷缺血部位、用圖像分析系統(tǒng)測量梗死體積，行蘇木精-伊紅(Hematoxylineosin，HE)染色觀察腦組織病理形態(tài)，免疫組織化學(xué)方法觀察ICAM-1、ET-1、bcl-2的表達。 分別比較：(1)對照組1與對照組2在相同再灌注各時間點神經(jīng)功能缺損評分、腦梗死體

5、積、腦組織病理形態(tài)及ICAM-1、ET-1、bcl-2的表達；(2)治療組1與對照組1在相同再灌注各時間點神經(jīng)功能缺損評分、腦梗死體積、腦組織病理形態(tài)及ICAM-1、ET-1、bcl-2的表達；(3)治療組2與對照組2在相同再灌注各時間點神經(jīng)功能缺損評分、腦梗死體積、腦組織病理形態(tài)及ICAM-1、ET-1、bcl-2的表達；(4)不同血糖條件對預(yù)防性聯(lián)合用藥對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷保護作用的影響。 結(jié)果：1、相同再灌注各時間

6、點正常血糖組神經(jīng)功能缺損評分好于高血糖組，且有顯著性差異(p＜0.05)。高血糖條件下，于缺血再灌注后3小時即出現(xiàn)梗死灶，再灌注24小時內(nèi)梗死體積逐漸增大，再灌注6小時與3小時、24小時與6小時比較，均有顯著性差異(p＜0.05)；正常血糖組亦于缺血再灌注后3小時出現(xiàn)梗死灶，24小時內(nèi)腦梗死體積逐漸增大，相同再灌注各時間點與高血糖組相比，腦梗死體積明顯縮小，且有顯著性差異(p＜0.05)。在高血糖條件下，腦缺血區(qū)神經(jīng)元數(shù)目減少，神經(jīng)細胞

7、皺縮，變性，且與周圍分界清楚，胞核固縮，組織間水腫明顯，可見空泡化改變，隨著再灌注時間延長，缺血神經(jīng)元損害加重，呈不可逆性神經(jīng)細胞損傷性改變，絕大多數(shù)神經(jīng)細胞壞死；在相同再灌注各時間點正常血糖條件下腦缺血區(qū)隨著再灌注時間的延長，腦組織受損程度也逐漸加重，但與高血糖組相同再灌注各時間點比較變性、壞死的神經(jīng)元減少，空泡化改變減輕，組織間水腫減輕。高血糖條件下3小時可見ICAM-1陽性表達，24小時內(nèi)逐漸增高。再灌注3小時可見ET-1陽性表達

8、，24小時內(nèi)緩慢增加。bcl-2于再灌注3小時開始明顯增多，再灌注6小時達高峰，至24小時逐漸下降。正常血糖組與高血糖組相同再灌注各時間點比較：缺血區(qū)ICAM-1、ET-1表達減少，bcl-2表達增加，且均有顯著性差異(p＜0.05)。 2、預(yù)防性應(yīng)用拜阿斯匹靈及西比靈能減輕正常血糖條件下的局灶性腦缺血再灌注損傷。正常血糖條件下聯(lián)合用藥預(yù)處理組相同再灌注各時間點神經(jīng)功能缺損評分好于正常血糖組(p＜0.05)；腦梗死體積明顯小于正

9、常血糖組(p＜0.05)；與正常血糖組相比變性、壞死的神經(jīng)元減少，空泡化改變減輕，組織間水腫減輕ICAM-1、ET-1表達明顯低于正常血糖組(p＜0.05)，而bcl-2表達則明顯高于正常血糖組(p＜0.05)。 3、預(yù)防性應(yīng)用拜阿斯匹靈及西比靈能減輕高血糖條件下的局灶性腦缺血再灌注損傷。高血糖條件下聯(lián)合用藥預(yù)處理組相同再灌注各時間點神經(jīng)功能缺損評分好于高血糖組(p＜0.05)；腦梗死體積明顯小于高血糖組(p＜0.05)；與高血

10、糖組相比變性、壞死的神經(jīng)元減少，空泡化改變減輕，組織間水腫減輕；ICAM-1、ET-1表達明顯低于高血糖組(p＜0.05)，而bcl-2表達則明顯高于高血糖組(p＜0.05)。 4、預(yù)防性應(yīng)用拜阿斯匹靈及西比靈在正常血糖條件下與在高血糖條件下對局灶性腦缺血再灌注損傷保護作用不同，高血糖與拜阿斯匹靈及西比靈聯(lián)合預(yù)處理對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷之間起負(fù)交互作用(拮抗作用)。 結(jié)論：(1)高血糖能加重SD大鼠局灶性缺血再灌注