131I-1H12的制備及對(duì)A549非小細(xì)胞肺癌的生物學(xué)效應(yīng)研究.pdf

1、Preparationof(131)I1H12andItsBiologicalEffectsOnA549Non—smallCellLungCancerADissertationSubmittedtoSoutheastUniversityFortheAcademicDegreeofMasterofMedicineBYYinNingSupervisedbyDuMinghuaCollegeofClinicalMedicineSoutheast

2、UniversityApril2010中文摘要中文摘要131I1H12的制備及對(duì)A549非小細(xì)胞肺癌的生物學(xué)效應(yīng)研究目的(1)核素標(biāo)記：研究放射性核素碘(131I)標(biāo)記表皮生長(zhǎng)因子受體(EpidermalGrowthFactorReceptorEGFR)單克隆抗體(McAb)1H12的實(shí)驗(yàn)條件。(2)外實(shí)驗(yàn)：觀察標(biāo)記產(chǎn)物131I1H12與A549人肺癌細(xì)胞的免疫結(jié)合及其生物學(xué)效。(3)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：觀察記產(chǎn)物131I1H12在體內(nèi)對(duì)人肺癌A

3、549裸鼠移植瘤的治療及顯像作用，探討其靶向治療肺癌的有效性和可行性。方法(1)核素標(biāo)記：用Iodogen法標(biāo)記1H12：用葡聚糖凝膠G50(SephadexG一50)層析柱進(jìn)行分離；以生理鹽水紙層析法測(cè)定放射化學(xué)純度。(2)體外實(shí)驗(yàn)：經(jīng)體外細(xì)胞結(jié)合試驗(yàn)分析檢測(cè)標(biāo)記抗體的免疫活性；通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同劑量(148、74、37kBq)131I1H12，游離131I(148kBq)及1H12(80nmol／m1)對(duì)A549細(xì)胞的作用。(3

4、)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：建立表達(dá)表皮生長(zhǎng)因子受體的人肺癌荷瘤裸鼠模型；取36只裸鼠模型分為6組，分成高劑量組(148MBq131I1H12)、中劑量組(74MBql31I1H12)、低劑量組(37MBql31I1H12)治療組、單純核素組(74MBq131I)、單純抗體組(1H1204m1)、空白對(duì)照組，觀察腫瘤生長(zhǎng)增殖情況，131I1H12對(duì)正常組織臟器的放射毒副作用，治療期間通過(guò)SPECT顯像觀察放射性藥物在腫瘤中的濃聚作用。結(jié)果(1)核素標(biāo)記

5、：131I1H12標(biāo)記率為5014％，比活度為463MBq／ug，放射性濃度為7731MBq／ml，放射性化學(xué)純度為9692％。(2)體外實(shí)驗(yàn)：131I1H12與A549細(xì)胞結(jié)合率為6112％；131I1H12誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡和周期阻滯呈劑量效應(yīng)關(guān)系，以148kBql31I1H12作用效應(yīng)最大，凋亡率達(dá)到(4435331)％，G2／M期細(xì)胞阻滯率達(dá)(5117298)％。(3)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：自第1次給藥至第32天各時(shí)間段，高劑量組、中劑量

6、組、低劑量組與空白對(duì)照組腫瘤體積差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意(Po01)；裸鼠各組腫瘤抑制率分別為高劑量治療組1489％，中劑量治療組2014％，低劑量治療組3958％，單純核素組7632％，單純抗體組8876％，空白對(duì)照組9973％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P001)；光學(xué)顯微鏡下見(jiàn)高、中、低劑量組腫瘤細(xì)胞發(fā)生不同程度壞死；未發(fā)現(xiàn)肝、腎和骨髓非特異性放射損傷；SPECT顯像示治療期間放射免疫治療各組腫瘤部位放射性濃聚。結(jié)論(1)核素標(biāo)記：成功完成了ⅢI對(duì)