快速老化癡呆小鼠聽(tīng)功能、耳蝸毛細(xì)胞和螺旋神經(jīng)元的退行性變化.pdf

1、目的: 本實(shí)驗(yàn)旨在探討快速老化癡呆小鼠( Senescence accelerated dementia mouse/prone,SAMP8)的聽(tīng)功能、耳蝸毛細(xì)胞和螺旋神經(jīng)元(spiral ganglion neurons,SGNs)的退行性變化特點(diǎn)。
　　方法: 選用3、9月齡的SAMP8小鼠作為實(shí)驗(yàn)組,同齡的抗快速老化小鼠亞系1(Senescence accelerated mouse/resistance1,SAMR1)作為

2、對(duì)照組。分別對(duì)各組小鼠采用8kHz短純音聽(tīng)性腦干反應(yīng)( auditory brainstem response,ABR)檢測(cè)雙耳聽(tīng)功能(ABR閾值)、耳蝸基底膜鋪片毛細(xì)胞計(jì)數(shù)計(jì)算左側(cè)耳蝸底回外毛細(xì)胞平均缺失率、末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP原位切口末端標(biāo)記[terminal deoxynucle-otidyl transferase(TdT) dUTP nick end labeling] TUNEL免疫組織化學(xué)染色觀察右側(cè)耳蝸中軸

3、位石蠟切片SGNs TUNEL染色陽(yáng)性率。
　　結(jié)果: 1.聽(tīng)功能檢測(cè):實(shí)驗(yàn)組3、9月齡SAMP8小鼠的左耳ABR閾值(dB SPL)分別為36.5±3.81、52.6±3.00;對(duì)照組3、9月齡SAMR1小鼠的左耳ABR閾值(dB SPL)分別為35.7±0.82、37.2±1.47。實(shí)驗(yàn)組3、9月齡SAMP8小鼠的右耳ABR閾值(dB SPL)分別為37.6±3.40、59.4±4.27;對(duì)照組3、9月齡SAMR1小鼠的右耳A

4、BR閾值(dB SPL)分別為34.5±1.05、36.3±2.07。實(shí)驗(yàn)組9月齡SAMP8小鼠與對(duì)照組9月齡SAMR1小鼠雙耳的ABR閾值差異均顯著(P<0.01);而實(shí)驗(yàn)組3、9月齡SAMP8小鼠雙耳的ABR閾值亦有顯著差異(P<0.01)。
　　2.耳蝸毛細(xì)胞改變:耳蝸基底膜鋪片光學(xué)顯微鏡下觀察,與對(duì)照組比較,隨著月齡的增加,實(shí)驗(yàn)組SAMP8小鼠耳蝸底回外毛細(xì)胞缺失加重;各組小鼠耳蝸底回外毛細(xì)胞平均缺失率(％)分別為:3月齡

5、實(shí)驗(yàn)組SAMP8小鼠2.5±0.91、3月齡對(duì)照組SAMR1小鼠1.6±0.80;9月齡實(shí)驗(yàn)組SAMP8小鼠19.5±3.73、9月齡對(duì)照組SAMR1小鼠2.7±1.11。實(shí)驗(yàn)組9月齡SAMP8小鼠與對(duì)照組9月齡SAMR1小鼠耳蝸底回外毛細(xì)胞平均缺失率差異顯著(P<0.01);而實(shí)驗(yàn)組3、9月齡SAMP8小鼠耳蝸底回外毛細(xì)胞平均缺失率亦有顯著差異(P<0.01)。
　　3.耳蝸SGNs TUNEL染色:耳蝸SGNs TUNEL染色

6、鏡下觀察,與對(duì)照組比較,隨著月齡的增加,實(shí)驗(yàn)組SAMP8小鼠耳蝸SGNs TUNEL染色陽(yáng)性率增高;各組小鼠耳蝸SGNs TUNEL染色陽(yáng)性率(%)分別為:3月齡實(shí)驗(yàn)組SAMP8小鼠3.18±1.70、3月齡對(duì)照組SAMR1小鼠2.14±1.39;9月齡實(shí)驗(yàn)組SAMP8小鼠18.22±4.71、9月齡對(duì)照組SAMR1小鼠3.63±1.42。實(shí)驗(yàn)組9月齡SAMP8小鼠與對(duì)照組9月齡SAMR1小鼠耳蝸SGNs TUNEL染色陽(yáng)性率差異顯著(