寒冷高鹽致大鼠主動脈及腎臟損害.pdf

1、目的：探討寒冷、高鹽和寒冷與高鹽復(fù)合刺激對大鼠血壓的影響及主動脈和腎臟的損害。
　　 方法：
　　 雄性SD大鼠32只,體重250-300克,隨機(jī)分為4組(n=8):1.對照組:常規(guī)喂養(yǎng)；2.寒冷組:常規(guī)喂養(yǎng),每天置于5℃人工氣候箱4小時；3.高鹽組:含8％食鹽飼料喂養(yǎng)；4.復(fù)合組:同時接受8％食鹽飼料和冷刺激。為期8周。于實驗前1周開始測量血壓,每周2次,每次讀數(shù)3次,取它們的平均值為該周血壓,并計算SBP曲線下面積(

2、SBP-AUC)。于實驗第3天、4周末、8周末將大鼠用代謝籠收集24小時尿液,測定尿微量白蛋白(mALB)、視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)、鈉(Na+)和鉀(K+)濃度,計算24h尿mALB、RBP、Na+和K+排出量。8周后,于頸總動脈處插管取血離心后獲得血清,解剖出主動脈及腎臟。ELISA法測定大鼠血清內(nèi)皮素-1(ET-1)和血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)的濃度。HE染色于光鏡觀察主動脈結(jié)構(gòu)的改變,并測量主動脈管腔內(nèi)徑及內(nèi)中膜厚度,計算內(nèi)中膜厚

3、度/管腔內(nèi)徑。枸櫞酸鉛電子染色于電鏡觀察主動脈內(nèi)皮細(xì)胞的改變。RT-PCR法測定主動脈ET-1和內(nèi)皮素A型受體(ETAR)mRNA的表達(dá)及。腎臟血管緊張素1型受體(AT1R)及血管緊張素2型受體(AT2R)mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.SBP變化
　　 高鹽組大鼠1周時SBP升高,7周時達(dá)高峰；寒冷組3周時升高,5周時達(dá)高峰；復(fù)合組1周時SBP升高,5周時達(dá)高峰,且明顯高于其他兩組。實驗期間寒冷組、高

4、鹽組和復(fù)合組SBP-AUC均明顯高于對照組(871.23±52.54、866.43±56.22、938.64±52.90 vs777.60±26.68 mmHg.w,P<0.01),以復(fù)合組最高,寒冷組與高鹽組之間無明顯差異。
　　 2.血清中ET-1和AngⅡ濃度
　　 寒冷組、高鹽組及復(fù)合組血清ET-1濃度(13.56±2.25、11.90±1.94、16.5±1.79 vs9.32±1.59pg/ml,P<0.01

5、)及AngⅡ濃度(574.4±63.2、502.2±82.4、624.3±85.5 vs455.6±72.1pg/ml,P<0.01)均明顯高于對照組,復(fù)合組最高,寒冷組次之。
　　 3.大鼠主動脈重構(gòu)及ET-1和ETAR mRNA表達(dá)
　　 光鏡示:寒冷組、高鹽組和復(fù)合組主動脈內(nèi)中膜厚度較對照組明顯增厚,內(nèi)中膜厚度/管腔內(nèi)徑也明顯增高。復(fù)合組表現(xiàn)最為明顯,且復(fù)合組平滑肌細(xì)胞間質(zhì)出現(xiàn)明顯黏液樣變性。電鏡示各干預(yù)組內(nèi)皮細(xì)胞

6、出現(xiàn)明顯的水腫、空泡變性,部分變性壞死的內(nèi)皮細(xì)胞與基底膜剝離,復(fù)合組表現(xiàn)尤為明顯。各干預(yù)組主動脈的ET-1及ETAR mRNA表達(dá)均明顯高于對照組,復(fù)合組最高,寒冷組與高鹽組之間無明顯差異。
　　 4.各組大鼠24h尿mALB,RBP,Na+和K+排出量的比較
　　 4周時各組24h尿mALB排出量無顯著差異,但3個干預(yù)組24h尿RBP排出量均高于對照組；8周時各干預(yù)組24h尿mALB排出量均高于對照組,且寒冷組明顯高于

7、高鹽組(5.4±0.9 vs4.4±0.8 mg,P<0.05),而24h尿RBP排出量卻明顯低于高鹽組(71.5±20.1 vs86.9±9.7μg,P<0.05)。
　　 24h尿Na+和K+排出量及Na+/K+比值隨著干預(yù)時間的延長均呈遞增趨勢。8周時,寒冷組、高鹽組、復(fù)合組24h尿Na+排出量均明顯高于對照組(5.38±0.45、46.61±3.80、60.61±4.77 vs2.39±0.39 mmol.,P<0.01

8、)。寒冷組24h尿K+排出量與對照組相比無明顯區(qū)別,而高鹽組和復(fù)合組明顯高于寒冷組及對照組(4.60±0.45、5.48±0.85 vs1.52±0.27mmol、1.21±0.42mmol,P<0.01)。
　　 5.腎臟中AT1R及AT2R mRNA的表達(dá)
　　 寒冷組、高鹽組及復(fù)合組腎臟中AT1RmRNA表達(dá)明顯高于對照組(0.48±0.01、0.33±0.02、1.16±0.04 vs0.04±0.01,P<0.

9、01),而.AT2R mRNA表達(dá)明顯低于對照組(0.38±0.02,0.44±0.04、0.30±0.02 vs0.80±0.06,P<0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.寒冷、高鹽刺激均能引起血壓升高、主動脈結(jié)構(gòu)和腎臟功能損害,二者復(fù)合刺激導(dǎo)致的損害更為明顯。復(fù)合刺激致內(nèi)皮素和RAAS的激活程度與主動脈結(jié)構(gòu)和腎臟功能損害程度相關(guān)。
　　 2.寒冷更容易導(dǎo)致腎小球功能損害,因為可能與腎組織AT1R表達(dá)上調(diào)更明