樹突狀細胞（DC）的培養(yǎng)及CEA-重組痘苗病毒轉染DC誘導的特異性T細胞免疫.pdf

1、第一軍醫(yī)大學碩士學位論文樹突狀細胞（DC）的培養(yǎng)及CEA-重組痘苗病毒轉染DC誘導的特異性T細胞免疫姓名：吳軍申請學位級別：碩士專業(yè)：消化內科指導教師：王曉懷;周殿元2001.5.30簡單摘要／／7 ^ ＼體外成功地完成了C D l 4 + 單核細胞來源的樹突狀g 啦( D C ) 的蕉養(yǎng)，并進一步研究人癌胚抗原重組痘苗病毒( r V ．C E A ) 轉染D C 后體外誘導的C E A 特異性細胞免疫。首先，分離癌癥患者的外周血單核細

2、胞，分別加入：重組人粒．單集落刺激因子( r h G M - C S F ) 1 0 0 0 U ／m l + I L ·4 5 0 0 U ／m l ( A 組) 、血G M - C S F1 0 0 0 U ／m l ( B 組) 及單純含1 0 ％牛血清的R P M I 1 6 4 0 ( C 組) 。體外培養(yǎng)一周后C 于光鏡及電鏡下觀察細胞的形態(tài)、流式細胞儀檢測細胞的表面標志、M T T 比色法檢測上述三種條件培養(yǎng)的細

3、胞對T 細胞的刺激增殖作用√結果，癌癥患者外周血中的單核細胞在r h G M ．C S F1 0 0 0 U ／m I + I L ．45 0 0 U ，m l 的條件下培養(yǎng)一周，就可看到典型的樹突狀細胞形態(tài)，其表面C D l 4 分子表達減少，H L A ·D R 、C D 5 4 、C D 4 0 、C D 8 3 及C D 8 6 分子的表達明顯增高，且具有明顯刺激T 細胞增殖的能力。成功地完成了外周血單核細胞來源的D