促進花生根瘤鐵跨膜運輸(GmDmt1;1)同源基因(Nramp family)的克隆及功能預(yù)測分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、鐵營養(yǎng)是豆科植物-根瘤菌這一共生體的形成、根瘤的發(fā)育、維持和保證類菌體固氮酶活性的必需營養(yǎng)元素,促進鐵元素跨類菌體周膜(Peribacteriodmembrane,PBM)運輸和吸收是增強豆科植物共生固氮的重要機制之一。從大豆(Glycinemax)根瘤類菌體周膜(PBM)中分離鑒定出與NRAMP基因家族具有同源性的(GmDmt1;1)基因,該基因能夠在根瘤的侵染、根瘤發(fā)育和根瘤固氮時表達,從而保證了共生固氮體系對鐵的不斷需求,大豆與花

2、生(ArachishypogaeaL.)相比,他們二者不僅都是雙子葉植物,在缺鐵脅迫條件下呈現(xiàn)機理Ⅰ反應(yīng),而且又是通過根瘤共生固氮的豆科植物,因此,他們二者的基因同源性更強,花生植株體內(nèi)應(yīng)該具有(GmDmt1;1)的同源基因。本研究從間作玉米改善花生鐵營養(yǎng)狀況并促進根瘤固氮功能增強的現(xiàn)象為切入點,通過已經(jīng)測序和證明功能的不同植物的同源基因蛋白序列呈現(xiàn)高度一致的cDNA片段分別設(shè)計保守性較強的外側(cè)和內(nèi)側(cè)雙重引物即嵌套引物(nestedpr

3、imer),利用RT-PCR反應(yīng)和分子克隆分離和鑒定控制花生根瘤鐵吸收利用的同源基因(GmDmt1;1)部分cDNA片段(860bp),與大豆的(GmDmt1;1)基因相比,二者的cDNA序列片段同源保守性為82%,蛋白序列則高達89%,而且該蛋白功能預(yù)測表明該基因?qū)儆贜ramp基因家族,并且該基因片段已經(jīng)具有六個典型的跨膜序列。表明在花生根瘤中存在促進鐵元素跨類菌體周膜(PBM)運輸和吸收并增強花生固氮的(GmDmt1;1)同源基因,

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